三氧化二砷對細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)生長的影響及作用機(jī)制.pdf

1、目的：
　　目前對包蟲病的治療,手術(shù)仍然是主要的手段，但術(shù)中易造成包蟲囊腫囊液外溢，以及未殺死的原頭節(jié)殘留于手術(shù)創(chuàng)面或腹腔，這是導(dǎo)致手術(shù)后復(fù)發(fā)最主要的原因，因此術(shù)中、術(shù)后應(yīng)用短時(shí)間內(nèi)殺死頭節(jié)又對周圍正常組織損傷小的藥物是阻止該病復(fù)發(fā)最常用的方法。
　　本研究以體外培養(yǎng)的細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)為研究對象，觀察三氧化二砷對綿羊細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)生長的影響，進(jìn)一步評價(jià)三氧化二砷用于臨床抗包蟲治療的可能性，為三氧化二砷在肝包蟲病治療的臨床應(yīng)

2、用提供依據(jù)。
　　方法：
　　將新鮮的自然感染細(xì)粒棘球蚴的綿羊肝臟帶回實(shí)驗(yàn)室，用無菌方式抽取囊內(nèi)容物置培養(yǎng)瓶中，然后體外培養(yǎng)原頭節(jié)3天，待適應(yīng)體外環(huán)境后分別用含2μmol/L、4μmol/L、6μmol/L、8μmol/L濃度的三氧化二砷作用。用0.1％的伊紅溶液染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察三氧化二砷不同時(shí)間、不同濃度對原頭節(jié)的活力的影響（死的原頭節(jié)會被染成紅色），實(shí)驗(yàn)單獨(dú)重復(fù)三次，根據(jù)數(shù)值繪制活力曲線。SEM觀察原頭節(jié)表面超微

3、結(jié)構(gòu)；TEM觀察原頭節(jié)內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)的改變；用Caspase-3試劑盒檢測原頭節(jié)內(nèi)Caspase-3酶活性；Western blot檢測原頭節(jié)p-Akt蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　體外孵育14d后，空白1640對照組原頭節(jié)的活力幾乎沒有改變。三氧化二砷各濃度組均對原頭節(jié)有殺傷作用,8μmol/L三氧化二砷濃度組殺傷作用強(qiáng)于其他濃度組。表面超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)凹陷，原頭節(jié)呈外翻，頂突破壞，內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)變化有合胞體帶變薄、結(jié)構(gòu)松散,出