人早胚間充質(zhì)干細胞向上皮細胞轉(zhuǎn)型的研究（上皮干細胞發(fā)育的研究）.pdf

1、第二軍醫(yī)大學碩士學位論文人早胚間充質(zhì)干細胞向上皮細胞轉(zhuǎn)型的研究（上皮干細胞發(fā)育的研究）姓名：仵敏娟申請學位級別：碩士專業(yè)：人體解剖與組織胚胎學指導教師：劉厚奇20050401人早胚間充質(zhì)干細胞向上皮細胞轉(zhuǎn)型的研究(上皮干細胞發(fā)育的研究)目的：體外分離人早胚間充質(zhì)干細胞(hMSC)并誘導其分化為上皮細胞；探索間充質(zhì)干細胞向上皮細胞轉(zhuǎn)型(mesenchymalepithelialtransition，MET)的途徑、方法和分子機制。方法：1

2、首先分離培養(yǎng)hMSC，進行生物學特性和相關(guān)的安全性檢測，隨后進行大規(guī)模培養(yǎng)擴增。2創(chuàng)建體外誘導培養(yǎng)體系，誘導hMSC分化為上皮細胞，體外實驗MET；采用功能基因轉(zhuǎn)染的方式誘導hMSC分化為上皮細胞。3臨床實驗驗證hMSC轉(zhuǎn)型而來的上皮細胞的治療效果。結(jié)果：1成功分離了hMSC：大規(guī)模培養(yǎng)擴增后，仍能保持其生物學特性；低表達免疫移植排斥相關(guān)抗原。無細菌、真菌及HIV、HBV污染。2經(jīng)體外誘導培養(yǎng)體系誘導，可以分化為上皮細胞，并表達上皮細胞

3、特異性抗原(vWF、K19、K等)：功能基因轉(zhuǎn)染后，細胞形態(tài)改變明顯，E—cadherin及PFAK的表達量明顯增加。3，臨床實驗驗證表明可有效治療大面積皮膚燒傷。結(jié)論：hMSC可在體外大規(guī)模培養(yǎng)，體外誘導培養(yǎng)體系誘導下可實現(xiàn)hMSC向上皮細胞的轉(zhuǎn)型。Objection：Tofindawaytoinducehumanearlyembryomesenchymalstemcells(hMSC)intoepithelialcells加vitr

4、othentoexplorethepossibleapproach，methodandmolecularmechanismduringMETMethods：1IsolatedandculturedhMSCinvitro，detectedcellsbiologicalcharacterpathogendetectioninculturemediumwasalsoundertaken2Createdainductionsystemforme

5、senchymal—epithelialtransition／nvitro3FoundthetransittedcellspromisinginskinbumtherapythroughclinicalapplicationResults：1hMSCwereisolatedandexpandedmvitrosuccessfullycultureexpandedhMSCremaineditsbiologyeharacterislicsan

6、dcytogeneficsstabilitywiththeculturesystempathogenfree，reachingtherequirementofnationalregulations2。hMSCcouldachieveransitionintoepithelialcellsinvitro，andexpressthespecialantigenofepithelialcells，suchasK19，vWE3Thetransi