GX-50抗皮膚衰老的研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)室前期研究表明,源自花椒的天然活性物質(zhì)GX‐50對于NF‐κB途徑有抑制作用,根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,NF‐κB途徑的抑制可以逆轉(zhuǎn)皮膚衰老的發(fā)生,因此我們對GX‐50是否具有抗皮膚衰老的作用進(jìn)行了探究。本實(shí)驗(yàn)室前期研究采用20月齡高齡小鼠建立自然衰老模型,在小鼠背部涂藥,以小鼠脊柱為對稱軸,左側(cè)涂抹GX‐50,右側(cè)涂抹等量的PBS作為對照,應(yīng)用蘇木精‐伊紅(HE)染色和免疫組化的方法對GX‐50的作用進(jìn)行組織學(xué)觀測,并采用Image J軟件

2、對皮膚組織免疫組化切片中膠原蛋白含量變化進(jìn)行分析,實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示GX‐50在組織水平可能具有有效保護(hù)小鼠皮膚、一定程度地逆轉(zhuǎn)高齡小鼠皮膚衰老的發(fā)生、增加高齡小鼠皮膚膠原蛋白的表達(dá)的作用。
　　在組織水平,本研究采用Western blot對上述涂藥小鼠實(shí)驗(yàn)組和對照組皮膚組織膠原蛋白含量的變化進(jìn)行檢測。在細(xì)胞水平,以體外原代培養(yǎng)的人皮膚成纖維細(xì)胞為研究對象,用過氧化氫處理細(xì)胞建立人工衰老模型。采用β‐半乳糖苷酶染色法,細(xì)胞分泌物丙二醛

3、(MDA)變化的檢測和細(xì)胞胞內(nèi)活性氧(ROS)含量變化的測定研究GX‐50抗皮膚細(xì)胞衰老的作用。采用Draize兔眼刺激性實(shí)驗(yàn)對GX‐50的刺激性進(jìn)行評價(jià)。Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,GX‐50在組織水平可以在一定程度上有效地增加膠原蛋白的表達(dá)。在細(xì)胞水平,β‐半乳糖苷酶染色實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:GX‐50預(yù)處理后過氧化氫處理組人皮膚成纖維細(xì)胞β‐半乳糖苷酶染色陽性率明顯低于過氧化氫單獨(dú)處理組; MDA檢測結(jié)果顯示:GX‐50處理組比

4、空白組MDA分泌量下降30.45％,GX‐50預(yù)處理后過氧化氫處理組比過氧化氫單獨(dú)處理組MDA分泌量下降61.46%;人皮膚成纖維細(xì)胞胞內(nèi)ROS熒光檢測顯示:GX‐50處理組比對照組熒光值下降8.03%,GX‐50預(yù)處理后過氧化氫處理組比過氧化氫單獨(dú)處理組熒光值下降8.36%。根據(jù)Draize兔眼刺激性實(shí)驗(yàn)評價(jià)標(biāo)準(zhǔn):GX‐50各項(xiàng)刺激性均為零,表明對兔眼無刺激。綜上所述,GX‐50可以一定程度保護(hù)皮膚并逆轉(zhuǎn)皮膚衰老的發(fā)生,且根據(jù)經(jīng)典的D