黃芪抗氧化組分及其與三七總皂甙復(fù)合對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的改善作用.pdf

1、黃芪(Astragalus)素以“補(bǔ)氣諸藥之最”著稱。具有保護(hù)心血管系統(tǒng)，抗心率失常，擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈和外周血管，降低血壓，減少血栓形成，降血脂，抗衰老，抗缺氧，抗輻射，保肝等作用。本實(shí)驗(yàn)以氧化穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)(OSI)確定中藥黃芪抗氧化活性部位，并以高脂膽固醇喂養(yǎng)法和人血管內(nèi)皮細(xì)胞(Ve)培養(yǎng)技術(shù)分別建立體內(nèi)、體外動(dòng)脈粥樣硬化(AS)模型，綜合研究黃芪抗氧化活性成分對(duì)AS的改善作用。
　　 首先用石油醚、乙酸乙酯、95％乙醇為溶劑對(duì)黃芪

2、進(jìn)行索氏抽提。在此基礎(chǔ)上，用氧化穩(wěn)定測(cè)定儀(OSI)篩選確定了黃芪乙酸乙酯為其抗氧化活性最強(qiáng)部位。
　　 其次通過人血管內(nèi)皮細(xì)胞(Ve)體外培養(yǎng)技術(shù)，從促細(xì)胞生長(zhǎng)方面篩選了黃芪石油醚、乙酸乙酯、95％溶劑乙醇提取部位，結(jié)果表明在5～30μg/ml時(shí)，黃芪乙酸乙酯提取部位細(xì)胞增值效果最好。促細(xì)胞生長(zhǎng)作用大小依次為：乙酸乙酯提取物＞95％乙醇提取物＞石油醚提取物。
　　 根據(jù)OSI法和人血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，確定黃芪乙酸

3、乙酯部位為其最強(qiáng)抗氧化部位，同時(shí)具有較強(qiáng)的促Ve細(xì)胞生長(zhǎng)作用。故將乙酸乙酯提取物作為目標(biāo)分離組分，運(yùn)用硅膠柱層析、TLC等分離手段對(duì)黃芪乙酸乙酯部位進(jìn)行分離提純，并得到了三個(gè)單體化合物，根據(jù)其理化性質(zhì)和波譜分析，鑒定其分別為：β-谷甾醇、芒柄花素、毛蕊異黃酮。將獲得的單體化合物進(jìn)行體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)三種化合物都具有較好的促Ve細(xì)胞增殖作用，及缺氧損傷保護(hù)作用。
　　 分離得到的單體化合物β-谷甾醇、芒柄花素、毛蕊異黃酮進(jìn)行體外細(xì)

4、胞實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)其促VE細(xì)胞生長(zhǎng)及對(duì)連二亞硫酸鈉造VE細(xì)胞缺氧損傷的保護(hù)作用，并以西藥抗動(dòng)脈粥樣硬化藥物(AASDs)洛伐他汀(Lov)作陽(yáng)性對(duì)照。最終結(jié)果表明，在促細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)面及缺氧損傷保護(hù)作用方面，各實(shí)驗(yàn)濃度下，各給藥組效果不同。綜合來(lái)看，促細(xì)胞生長(zhǎng)作用大小依次為：毛蕊異黃酮＞芒柄花素＞β-谷甾醇＞洛伐他?。蝗毖鯎p傷保護(hù)作用大小依次為：芒柄花素＞毛蕊異黃酮＞洛伐他?。睛?谷甾醇。
　　 最后，本實(shí)驗(yàn)采用高酯飼料喂養(yǎng)鵪鶉造動(dòng)脈粥樣

5、硬化模型(AS)，考察黃芪抗氧化活性組分及其與三七總皂甙(PNS)配伍組分對(duì)實(shí)驗(yàn)性動(dòng)脈粥樣硬化的影響，并以目前市場(chǎng)上廣范使用的心血管藥物洛伐他汀做陽(yáng)性對(duì)照。給藥8周，檢測(cè)血清總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、總抗氧化能力(T-AOC),超氧化物歧化酶(SOD)，丙二醛(MDA)含量。結(jié)果表明黃芪抗氧化活性組分及其與PNS配伍組分可顯著(P＜0.1)降低血清TC、TG、