亞甲藍(lán)光化學(xué)法滅活血漿中丙型肝炎病毒的分子生物學(xué)機(jī)理.pdf

1、本文對亞甲藍(lán)光化學(xué)法滅活血漿中丙型肝炎病毒的分子生物學(xué)機(jī)理進(jìn)行了研究。文章構(gòu)建了分別插入HCV 5’-NCR和C區(qū)基因、NS<,2>基因片斷的2個(gè)重組質(zhì)粒，鑒定后進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄試驗(yàn)。將體外轉(zhuǎn)錄的HCV RNA分別用代血漿(羥乙基淀粉20-氯化鈉注射液，HES20)和PBS緩沖液稀釋至與血漿所含病毒相近的濃度(≥10<'5>copies)，在無除核酸以外的病毒構(gòu)件及病毒蛋白成分的條件下進(jìn)行與前述實(shí)驗(yàn)條件相同的MB-P處理。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，體外轉(zhuǎn)錄

2、HCV RNA在MB-P處理下依然能發(fā)生降解，在處理20分鐘內(nèi)可檢測到的核酸量從3.2×10<'5>copies/ml降低到6.2×10<'4>copies/ml，處理60分鐘后降低至2.0×10<'4>copies/ml，表明MB-P方法能直接作用于核酸，使核酸發(fā)生降解從而達(dá)到病毒滅活的目的。同時(shí)，血漿中病毒的核酸降解速率明顯快于HES20和PBS中的體外轉(zhuǎn)錄HCV RNA，提示除核酸以外的某些病毒構(gòu)件或蛋白可能會影響MB-P對HCV