薄荷醇吸嗅改善大鼠空間記憶能力及海馬區(qū)AchE與GluR1表達(dá)的研究.pdf

1、本文從以下幾個(gè)方面展開(kāi)論述:
　　研究背景和研究目的:
　　老年癡呆癥(阿爾茨海默病,Alzheimer’s disease,AD)是臨床上常見(jiàn)的精神性疾病。自1906年發(fā)現(xiàn)以來(lái),經(jīng)過(guò)一個(gè)多世紀(jì)的研究,至今仍然有大量問(wèn)題有待解決。目前治療AD的藥物,如乙酰膽堿酯酶(AchE)抑制劑,只能減輕AD患者的癥狀,但不能阻止病情的進(jìn)展。嗅覺(jué)系統(tǒng)提供了大腦與外部環(huán)境的直接聯(lián)系,與腦內(nèi)的許多掌管學(xué)習(xí)記憶的腦區(qū)密切相關(guān),這使得嗅覺(jué)通路成為

2、潛在的治療學(xué)習(xí)記憶衰退的有效途徑。芳香物質(zhì)如薄荷醇等被認(rèn)為具有提神醒腦,芳香開(kāi)竅等作用。本實(shí)驗(yàn)就是研究嗅覺(jué)通路與學(xué)習(xí)記憶之間的關(guān)系,并通過(guò)揮發(fā)性的芳香物質(zhì)薄荷醇對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響,評(píng)價(jià)其在治療AD等癡呆癥中的作用;為AD的嗅覺(jué)通路治療提供理論依據(jù),開(kāi)辟AD治療的新領(lǐng)域;并為芳香療法提供基礎(chǔ)理論支持。
　　第一部分薄荷醇吸嗅對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的神經(jīng)行為學(xué)觀察
　　實(shí)驗(yàn)方法:
　　將2g的薄荷醇溶于1000ml熱水中

3、充分溶解,置于密閉染毒箱中后,放入大鼠作用1h。連續(xù)7d,應(yīng)用Morris水迷宮進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)檢測(cè),通過(guò)定位航行試驗(yàn)和空間探索實(shí)驗(yàn)觀察大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的變化。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　　神經(jīng)行為學(xué)的結(jié)果顯示,吸入薄荷醇的SD大鼠,定位航行試驗(yàn)和空間探索實(shí)驗(yàn)與對(duì)照組比較,逃避潛伏期和平臺(tái)象限滯留時(shí)間明顯減少(P<0.05),說(shuō)明通過(guò)薄荷醇吸嗅后,大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力明顯提高。
　　第二部分薄荷醇吸嗅大鼠海馬區(qū)AchE與G

4、luR1免疫組化觀察
　　實(shí)驗(yàn)方法:
　　Morris水迷宮的定位航行試驗(yàn)和空間探索分析表明,吸嗅薄荷醇的SD大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力明顯提高(P<0.05)。為了觀察神經(jīng)行為學(xué)變化與神經(jīng)遞質(zhì)的關(guān)系,通過(guò)免疫組織化學(xué)的方法,研究薄荷醇吸嗅后對(duì)大鼠海馬區(qū)AchE及GluR1表達(dá)水平的變化,探討其引起大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力提高的機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　　腦組織的免疫組化結(jié)果顯示,吸入薄荷醇的SD大鼠,與對(duì)照組相比較,

5、海馬區(qū)AchE和GluR1的蛋白表達(dá)均明顯降低(P<0.01),積分光密度值和陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)也明顯減少(P<0.01)。
　　第三部分薄荷醇吸嗅大鼠海馬區(qū)AchE與GluR1表達(dá)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)觀察
　　實(shí)驗(yàn)方法:
　　為了進(jìn)一步觀察神經(jīng)遞質(zhì)的變化,通過(guò)RT-PCR和ELISA的方法,研究薄荷醇吸嗅后對(duì)大鼠海馬區(qū)AchE及GluR1表達(dá)水平的變化,探討其引起大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力提高的機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　

6、　腦組織的RT-PCR結(jié)果顯示,吸入薄荷醇的SD大鼠,與對(duì)照組相比較,海馬區(qū)AchE和GluR1的mRNA表達(dá)均明顯降低(P<0.01)。ELISA結(jié)果表明,吸入薄荷醇的SD大鼠,與對(duì)照組相比較,海馬區(qū)AchE的表達(dá)明顯降低。
　　結(jié)論:
　　1.發(fā)現(xiàn)薄荷醇通過(guò)嗅覺(jué)通路可以明顯提高大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力;
　　2.薄荷醇通過(guò)嗅覺(jué)通路吸嗅后可以明顯降低大鼠海馬區(qū)AchE和GluR1的表達(dá)量;
　　3.薄荷醇通過(guò)嗅覺(jué)通路