母嬰分離應(yīng)激對(duì)幼鼠成年后抑郁發(fā)生及GluR1和磷酸化GluR1(ser845)表達(dá)的影響.pdf

1、研究背景：
　　目前，抑郁癥已成為引起死亡和殘疾（喪失工作或生活能力）的十大疾病之一。世界衛(wèi)生組織估計(jì)至2020年抑郁癥將成為全球第二大疾病。雖然抑郁癥嚴(yán)重威脅著人類(lèi)的健康并給家庭和社會(huì)帶來(lái)巨大的精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，但是由于抑郁癥的病因病理不明確，并且缺乏特異的診斷指標(biāo)和理想的治療藥物，導(dǎo)致抑郁癥的診治效果不理想。
　　研究表明遺傳和社會(huì)環(huán)境因素均參與了抑郁癥的發(fā)生。在社會(huì)環(huán)境因素里，應(yīng)激是主要的風(fēng)險(xiǎn)因素。人類(lèi)生命早期是情感、認(rèn)

2、知和行為模式建立和發(fā)展的關(guān)鍵時(shí)期。生命早期出現(xiàn)不良事件會(huì)影響到人類(lèi)成年后的心理、認(rèn)知過(guò)程及行為。流行病學(xué)資料提示生命早期不良應(yīng)激增加了罹患抑郁癥的風(fēng)險(xiǎn)。早期的應(yīng)激與抑郁癥發(fā)生的相關(guān)性顯著高于近期的應(yīng)激事件與抑郁癥的相關(guān)性。童年有創(chuàng)傷性事件經(jīng)歷的抑郁癥患者表現(xiàn)出發(fā)病年齡相對(duì)較小、抑郁癥狀更為嚴(yán)重、更易反復(fù)發(fā)作及常用抗抑郁藥物治療效果明顯降低的特點(diǎn)。這些研究都提示了成年后罹患抑郁癥的易感性與生命早期的不良應(yīng)激的經(jīng)歷密切相關(guān)。但這現(xiàn)象的機(jī)制仍

3、不清楚。
　　目的：
　　研究早期不良應(yīng)激是否易化成年后抑郁樣行為的發(fā)生，探索該易化作用與GluR1的表達(dá)及其絲氨酸845位點(diǎn)磷酸化水平的關(guān)系，尋求改善這種易化作用和治療抑郁的方法。
　　方法：
　　（1）建立早期母嬰分離模型，模擬人類(lèi)生命早期不良成長(zhǎng)環(huán)境，于大鼠成年后給予慢性束縛應(yīng)激，模擬成年后遇到不良生活事件的情境。將SD(SpragueDawley)孕鼠分娩的子代雄性鼠隨機(jī)平均分為對(duì)照（control）組、

4、母嬰分離(MS)組、慢性應(yīng)激(stress)組和母嬰分離和慢性應(yīng)激(MS+stress)組，通過(guò)曠場(chǎng)、強(qiáng)迫游泳和新環(huán)境進(jìn)食實(shí)驗(yàn)比較各組間行為學(xué)差異，并用Western blot檢測(cè)GluR1和磷酸化GluR1（ser845）在海馬和前額葉皮質(zhì)表達(dá)的變化。
　　（2）側(cè)腦室微量注射H89（選擇性PKA阻斷劑）抑制GluR1絲氨酸845位點(diǎn)的磷酸化，通過(guò)曠場(chǎng)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠行為學(xué)差異，并用Western blot檢測(cè)磷酸化Glu

5、R1（ser845）和GluR1在海馬和前額葉皮質(zhì)表達(dá)的變化。
　　(3)建立母嬰分離模型，在母嬰分離大鼠成年后先連續(xù)5天腹腔注射丙咪嗪，再連續(xù)10天給予與其他組相同的慢性束縛應(yīng)激，通過(guò)曠場(chǎng)、強(qiáng)迫游泳和新環(huán)境進(jìn)食實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠行為學(xué)的改變，并用Western blot檢測(cè)磷酸化GluR1（ser845）和GluR1在海馬和前額葉皮質(zhì)表達(dá)的變化。
　　結(jié)果：
　　（1）與control組比較，MS組和stress組曠場(chǎng)、新

6、環(huán)境進(jìn)食抑制和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果并未表現(xiàn)出差別，而MS+stress組表現(xiàn)出曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中運(yùn)動(dòng)總距離顯著減少（P＜0.01)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中不動(dòng)時(shí)間顯著增長(zhǎng)（P＜0.01)、新環(huán)境禁食抑制實(shí)驗(yàn)中進(jìn)食潛伏期顯著增長(zhǎng)（P＜0.01）等抑郁樣行為。
　　（2）與control組比較，MS組磷酸化GluR1（ser845）在海馬和前額葉皮質(zhì)的表達(dá)無(wú)減少，而GluR1的表達(dá)均顯著減少（P＜0.01)，stress組磷酸化GluR1（ ser845

7、）在海馬和前額葉皮質(zhì)的表達(dá)升高，在海馬中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05)，MS+stress組磷酸化GluR1（ser845）和GluR1在海馬和前額葉皮質(zhì)的表達(dá)均顯著減少（P＜0.05)。
　　（3） H89組GluR1在海馬和前額葉皮質(zhì)中的表達(dá)較vehicle組均無(wú)差異（P＞0.05)，但磷酸化GluR1（ser845）在海馬和PFC中的表達(dá)均較vehicle組顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05)。
　　（4）與

8、vehicle組比較，在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中 H89組不動(dòng)時(shí)間顯著增加（P＜0.01)，而且在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中H89組運(yùn)動(dòng)總距離顯著減少（P＜0.05)。
　?。?）與MS+stress組比較，MS+imipramine+stress組大鼠分別在曠場(chǎng)、強(qiáng)迫游泳和新環(huán)境進(jìn)食抑制實(shí)驗(yàn)中總距離顯著提高（P＜0.05)、不動(dòng)時(shí)間和進(jìn)食潛伏期顯著減少（ P＜0.01)。MS+imipramine+stress組大鼠上述行為學(xué)檢測(cè)結(jié)果與control組比

9、較無(wú)差異（P＞0.05)。
　　（6）MS+imipramine+stress組磷酸化GluR1（ser845）與GluR1在海馬和前額葉皮質(zhì)的表達(dá)量較MS+stress組顯著增高（P＜0.05)，較control組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05)。
　　結(jié)論：
　?。?）母嬰分離應(yīng)激易化幼鼠成年后抑郁樣行為的發(fā)生。
　?。?）母嬰分離應(yīng)激引起的GluR1蛋白水平的下降可能是導(dǎo)致成年后易化抑郁行為的生物學(xué)基礎(chǔ)。