AMPA受體GluR1、GluR3亞基膜運(yùn)輸在丙泊酚后處理長程腦保護(hù)作用中的研究.pdf

1、目的：隨著人口老齡化以及腦血管病發(fā)生年輕化趨勢(shì)的加劇，缺血性腦血管病的發(fā)病率逐年升高，且圍手術(shù)期的相關(guān)診治措施亦可增加腦缺血的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。因此對(duì)于術(shù)前已存在腦缺血或術(shù)中可能發(fā)生腦缺血的高危人群，圍術(shù)期麻醉藥物的選擇是麻醉醫(yī)師需要慎重思考的問題。丙泊酚是目前最為常用的靜脈麻醉藥，能夠降低腦氧代謝率、顱內(nèi)壓，且具有抗氧化和抑制細(xì)胞凋亡的作用，從而能夠減輕腦缺血再灌注損傷。本項(xiàng)目組前期研究顯示，丙泊酚后處理對(duì)腦缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用，且作用

2、機(jī)制可能與穩(wěn)定腦缺血過程中突觸后膜α-氨基-3-羥基-5-甲基-4-異噁唑丙酸(AMPA)受體谷氨酸受體(GluR)2亞基的表達(dá)有關(guān)。本研究旨在觀察丙泊酚后處理是否對(duì)腦缺血再灌注損傷具有長時(shí)程延遲性保護(hù)作用，并進(jìn)一步探討AMPA受體GluR1、GluR3亞基是否參與其中，從而為臨床上腦缺血及其高危人群麻醉藥物的合理選擇提供理論依據(jù)。
　　方法：健康成年SD雄性大鼠176只，體重250～280g，隨機(jī)分為4組(n=44)：假手術(shù)組(

3、Sham組，再灌注即刻經(jīng)靜脈輸注與丙泊酚等體積的生理鹽水2h)、局灶性腦缺血再灌注組(I/R組，再灌注即刻經(jīng)靜脈輸注等體積生理鹽水2h)、內(nèi)酯對(duì)照組(Intra組，再灌注即刻經(jīng)靜脈輸注等體積英脫利匹特2h)、丙泊酚組(Pro組，再灌注即刻經(jīng)靜脈輸注丙泊酚20mg·kg-1·h-1，維持2h)，采用線栓法建立大鼠局灶性腦缺血模型，栓塞大鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈60min后施行再灌注。術(shù)中維持大鼠呼吸、循環(huán)及體溫平穩(wěn)，缺血后第1、3、7、14、21

4、、28天采用Garcia評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)(18分制)對(duì)各組大鼠進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)功能評(píng)分，缺血后第1、7、14、28天采用TTC染色法檢測(cè)腦組織梗死灶體積變化，缺血后第9、23天開始分別進(jìn)行兩周期的Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠認(rèn)知功能的改變，并于缺血后第1、14、28天留取標(biāo)本采用Westernblot法檢測(cè)AMPA受體GluR1、GluR3亞基缺血側(cè)海馬總蛋白和膜蛋白的表達(dá)，缺血后第28天留取標(biāo)本采用免疫熒光雙標(biāo)法檢測(cè)缺血損傷后同側(cè)海馬齒狀回神

5、經(jīng)干細(xì)胞的增殖和分化情況。
　　結(jié)果：與Sham組比較，I/R組、Pro組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分下降，腦梗死體積增加，逃避潛伏期明顯延長，跨越平臺(tái)次數(shù)減少(P<0.01)，目標(biāo)象限游泳時(shí)間比和目標(biāo)象限游泳距離比減小(P<0.05)，缺血側(cè)海馬組織GluR1、GluR3亞基總蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，GluR1在膜表面表達(dá)在缺血后第1、14天明顯上調(diào)(P<0.05)，GluR3在膜表面表達(dá)在缺血后第1天明顯上調(diào)，BrdU+

6、NeuN雙標(biāo)陽性細(xì)胞數(shù)增加；與I/R相比，Pro組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分改善，腦梗死體積縮小，跨越平臺(tái)次數(shù)增加(P<0.05)，逃避潛伏期縮短(P<0.05)，目標(biāo)象限游泳時(shí)間比和目標(biāo)象限游泳距離比增加(P<0.05)，缺血側(cè)海馬組織GluR1、GluR3總蛋白表達(dá)無明顯變化(P>0.05)，而GluR1在膜表面的表達(dá)在1天、14天明顯減少(P<0.05)，GluR3在膜表面的表達(dá)在1天明顯減少(P<0.05)，BrdU+NeuN雙標(biāo)陽性細(xì)胞