富氫水聯(lián)合丙泊酚后處理對乳鼠離體腦片谷氨酸損傷后保護作用的研究.pdf

1、目的：1、研究富氫水對乳鼠離體腦片谷氨酸損傷后的保護作用，并探討其在乳鼠離體腦片損傷后保護作用的最佳濃度；2、研究富氫水（hydrogen-rich water）聯(lián)合丙泊酚（propofol）后處理對谷氨酸（L-Glutamic Acid，Glu）致乳鼠離體腦片損傷的保護作用，并探討其機制。
　　方法:1、切取并培養(yǎng)出生7天的SD大鼠乳鼠離體腦片，隨機分為10個小組。實驗分兩個步驟進行。第一步：探索富氫水最佳保護濃度，5個小組分別

2、為：25μmol/l富氫水+谷氨酸損傷組（HL25+Glu組）、50μmol/l富氫水+谷氨酸損傷組（HL50+Glu組）、100μmol/l富氫水+谷氨酸損傷組（HL100+Glu組）、200μmol/l富氫水+谷氨酸損傷組（HL200+Glu組）、300μmol/l富氫水+谷氨酸損傷組（HL300+Glu組）；第二步，探討富氫水聯(lián)合丙泊酚的保護作用，5個小組分別為：正常對照組，Glu損傷組（Glu損傷組），3 mg/L丙泊酚處理組（

3、PL3+Glu處理組），100μmol/l富氫水后處理組(HL100+Glu處理組)，富氫水丙泊酚聯(lián)合組（HL100+ PL3+Glu處理組）。每組12例。將Glu損傷組、HL25+Glu組、HL50+Glu組、HL100+Glu組、HL200+Glu組、HL300+Glu組及PL3+Glu、HL100+Glu、HL100+ PL3+Glu處理組均培養(yǎng)至第六天，用含1 mmol/L Glu的培養(yǎng)基損傷30min，建立缺血再灌注模型，損傷

4、后將Glu損傷組移入正常的完全培養(yǎng)基，將HL25+Glu組、HL50+Glu組、HL100+Glu組、HL200+Glu組、HL300+Glu組及PL3+Glu、HL100+Glu、HL100+ PL3+Glu處理組分別移入含相應(yīng)處理藥物的完全培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，每3小時換液一次，共8次，24小時。不同富氫水濃度組檢測尼氏小體數(shù)量，藥物處理組檢測蘇木素一伊紅（HE）染色，尼氏小體計數(shù)、乳酸脫氫酶（Lactate dehydrogenase

5、LDH）釋放率、堿性成纖維生長因子（bFGF）數(shù)目的測定來比較各組腦片神經(jīng)細胞的損傷程度。
　　結(jié)果：1、與富氫水其他濃度組相比，濃度為100μmol/l的富氫水后處理組的尼氏小體數(shù)量最多；2、與正常對照組相比，Glu損傷后的各組腦片中神經(jīng)細胞均受到一定程度的損傷，表現(xiàn)為細胞數(shù)量減少，細胞膜破碎，胞核皺縮，LDH釋放率、bFGF數(shù)量明顯增高；尼氏小體數(shù)量減少；3、與Glu損傷組相比，富氫水及丙泊酚后處理的各組,均能改善腦片中神經(jīng)細

6、胞形態(tài)結(jié)構(gòu)受損的情況，細胞膜破損減輕，胞核較完整，均能使尼氏小體數(shù)量增加，LDH釋放率及bFGF數(shù)量降低，而兩者之間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義；4、富氫水聯(lián)合丙泊酚后處理組的尼氏小體數(shù)量較丙泊酚藥物后處理組增加，LDH釋放率及bFGF數(shù)量均降低；與100μmol/l的富氫水后處理組相較，藥物聯(lián)合組的尼氏小體數(shù)量增加，而LDH釋放率及bFGF數(shù)量均增加。
　　結(jié)論：1、不同濃度的富氫水對谷氨酸介導(dǎo)的乳鼠離體腦片損傷確有一定的保護作用，其中以