依達(dá)拉奉和神經(jīng)節(jié)苷脂預(yù)處理對乳鼠離體腦片不同性質(zhì)損傷神經(jīng)保護(hù)作用的比較研究.pdf

1、目的：比較依達(dá)拉奉（EDA）和神經(jīng)節(jié)苷脂（GM1）預(yù)處理對谷氨酸及過氧化氫不同性質(zhì)損傷后大鼠皮層腦片的神經(jīng)保護(hù)作用。
　　方法：采用新生7日齡SD大鼠，取出大腦后采用切片機(jī)將皮層部分切為腦片進(jìn)行離體腦片培養(yǎng)，因不同性質(zhì)損傷采用谷氨酸損傷模型和過氧化氫損傷模型兩種模型，兩種損傷模型又分別分為對照組、損傷組、100μmol/L EDA預(yù)處理組及1μmol/L GM1預(yù)處理組，由于對照組相同，所以共分7組，每組12例。對照組腦片培養(yǎng)第四

2、天用正常培養(yǎng)基替代損傷培養(yǎng)基孵育30min；損傷組（分2組）腦片于培養(yǎng)第四天給予含1mmol/L谷氨酸或0.1mmol/L過氧化氫的培養(yǎng)基孵育30min；藥物保護(hù)預(yù)處理組（分4組）腦片于培養(yǎng)第三天轉(zhuǎn)至含有100μmol/L EDA或1μmol/L GM1的培養(yǎng)基中孵育24h，第四天同損傷組。谷氨酸或過氧化氫損傷后24h測定腦片2,3,5－三苯基四氮唑(TTC)染色的A490值并計(jì)算組織損傷率，用乳酸脫氫酶（LDH）釋放率分析腦片活性，用

3、熒光染料Propidium Iodide(PI)觀察細(xì)胞損傷程度；損傷后72h腦片用尼氏體染色檢測神經(jīng)元數(shù)量，用蘇木素-伊紅(HE)染色后在倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化，用透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變，用免疫組織化學(xué)方法檢測Caspase-9陽性表達(dá)細(xì)胞的數(shù)量。
　　結(jié)果：1.谷氨酸損傷模型兩種藥物預(yù)處理保護(hù)組與損傷組相比：藥物預(yù)處理組皮層腦片TTC染色A490值均升高，組織損傷率均減小，LDH釋放率均減小，PI熒光顯示紅色損

4、傷細(xì)胞數(shù)均減少，神經(jīng)元密度均增高，細(xì)胞形態(tài)受損程度和神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)病變均減輕，caspase-9表達(dá)陽性細(xì)胞均減少；2.谷氨酸損傷模型兩種藥物預(yù)處理保護(hù)組之間比較：均無發(fā)現(xiàn)明顯差異；3.過氧化氫損傷模型兩種藥物預(yù)處理保護(hù)組與損傷組相比：藥物預(yù)處理組皮層腦片TTC染色A490值均升高，組織損傷率均減小，LDH釋放率均減小，PI熒光顯示紅色損傷細(xì)胞數(shù)均減少，神經(jīng)元密度均增高，細(xì)胞形態(tài)受損程度和神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)病變均減輕，caspase-9表達(dá)