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1、貴陽醫(yī)學院2013屆碩士研究生論文《中國圖書資料分類法》分類號:R743.31單位代碼:10660學號:S0100365貴陽醫(yī)學院貴陽醫(yī)學院20132013屆碩士學位論文屆碩士學位論文神經生長因子和銀杏達莫預處理對乳鼠離神經生長因子和銀杏達莫預處理對乳鼠離體腦片谷氨酸和過氧化氫不同損傷保護作體腦片谷氨酸和過氧化氫不同損傷保護作用的比較研究用的比較研究研究生:研究生:陳廣福陳廣福導師:師:王迪芬王迪芬劉懷清劉懷清盧建明盧建明年級:級:20
2、102010級專業(yè):業(yè):麻醉學麻醉學20132013年5月1日貴陽醫(yī)學院2013屆碩士研究生論文2神經生長因子和銀杏達莫預處理對乳鼠離體腦片過氧化氫和谷氨酸神經生長因子和銀杏達莫預處理對乳鼠離體腦片過氧化氫和谷氨酸不同損傷保護作用的比較研究不同損傷保護作用的比較研究專業(yè):麻醉學(重癥醫(yī)學)姓名:陳廣福導師:王迪芬劉懷清盧建明摘要摘要【目的】【目的】:摸索和熟練掌握乳鼠離體腦片的培養(yǎng)技術;建立離體腦片谷氨酸(Glu)和過氧化氫(H202)
3、的損傷模型;探討神經生長因子(NGF)和銀杏達莫預處理對乳鼠離體腦片Glu和H202損傷的保護作用及這種保護作用是否有差異性?!痉椒ǚ椒ā浚喝?天新生乳鼠皮層切成400μm厚度腦片置于有微孔膜的插入式培養(yǎng)皿內同時放入37℃5%CO2、95%空氣的標準培養(yǎng)箱內保持腦片在氣液界面上進行培養(yǎng)。腦片培養(yǎng)成功后隨機分為七組:A組(正常對照組),B組(Glu損傷組),C組(H202損傷組),D組(NGF預處理Glu損傷組)、E組(NGF預處理H20
4、2損傷組)、F組(銀杏達莫預處理Glu損傷組)、G組(銀杏達莫預處理H202損傷組)共7組(每組12個樣本)。NGF預處理組以最佳濃度50ugL進行預處理。銀杏達莫預處理組以最佳濃度40mgL進行預處理。D組和E組以50ugLNGF預處理24h后分別以1mmolLGlu和0.1mmolLH202損傷30分鐘,F組和G組以40mgL銀杏達莫預處理組24h后分別以1mmolLGlu和0.1mmolLH202損傷30分鐘,將所有分組換正常培養(yǎng)
5、基繼續(xù)培養(yǎng)72h后觀察。觀察指標為:顯微鏡下腦片形態(tài)學觀察;HE染色后腦片組織內細胞形態(tài)變化及透射電鏡下細胞超微結構的變化;235氯化三苯基四氮唑(TTC)染色比色法測定各組腦片組織損傷率變化;檢測乳酸脫氫酶(LDH)漏出率;使用免疫組織化學法檢測神經細胞標記物熱休克蛋白70(HSP70)陽性表達的變化。【結果】:【結果】:1.顯微鏡下培養(yǎng)腦片逐漸變薄向外遷移傾向、細胞形態(tài)完整、存活良好;A組HE染色腦片層次清楚,神經元數量多、密度大,
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