山東省仔豬腹瀉主要病原調(diào)查研究.pdf

1、試驗(yàn)主要從山東省5個(gè)地區(qū)的50例疑似豬源性致病性大腸桿菌病例中分離出的48株豬源性大腸桿菌進(jìn)行O血清型鑒定、耐藥性及致病性研究。O血清型鑒定試驗(yàn)結(jié)果表明:48株豬源性大腸桿菌分屬14種血清型，其中，流行的主要血清型為O139(18.75％)、O119(16.67％)、O89(12.50％)和O20(12.50％)，共29株，占定型菌株的60.42％。耐藥性試驗(yàn)結(jié)果表明:48株豬源性大腸桿菌對(duì)青霉素類抗生素、四環(huán)素類抗生素和氯霉素類抗生素

2、耐藥嚴(yán)重，以四環(huán)素、卡那霉素、氯霉素、阿莫西林和鏈霉素最為嚴(yán)重，對(duì)頭孢菌素類和氨基糖苷類抗生素敏感，以頭孢唑啉、丁胺卡那霉素和菌必治最為敏感，各分離菌株均有不同程度的多重耐藥性。致病性試驗(yàn)結(jié)果表明:48株豬源性大腸桿菌對(duì)小白鼠具有致病性。
　　 根據(jù)Genbank中豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)和豬流行性腹瀉病毒(PEDV)的基因組序列，結(jié)合兩種病毒基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，在對(duì)兩種病毒基因序列進(jìn)行同源性比較的基礎(chǔ)上，選擇二者的S蛋白基因

3、為引物設(shè)計(jì)區(qū)，根據(jù)PCR引物設(shè)計(jì)原則，應(yīng)用Primer5.0軟件設(shè)計(jì)出TGEV和PEDV各兩條引物。其中，TGEV的引物可擴(kuò)增出212bp的特異片段，PEDV的引物可擴(kuò)增出241 bp的特異片段。試驗(yàn)歸納出TGEV和PEDV單項(xiàng)RT-PCR體系的最優(yōu)引物濃度和退火溫度為:引物濃度，TGEV0.8-1.0μmol/L，PEDV1.0μmol/L，退火溫度，TCEV54℃，PEDV58℃。對(duì)山東省不同地區(qū)的24例疑似病毒性腹瀉病例進(jìn)行RT-