組蛋白H3乙?；閷?dǎo)TGFβ2上調(diào)H9C2細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子的研究.pdf

1、目的:
　　 探討轉(zhuǎn)化生長因子β2(transforming growth factor beta2，TGFβ2)對(duì)大鼠胚胎心肌細(xì)胞H9C2心臟發(fā)育相關(guān)核心轉(zhuǎn)錄因子Mef2c和GATA4表達(dá)的影響及其與組蛋白H3乙?；年P(guān)系。
　　 材料與方法:
　　 比較TGFβ2對(duì)細(xì)胞生長的影響。利用Real-time PCR檢測(cè)心肌細(xì)胞的心臟發(fā)育相關(guān)核心轉(zhuǎn)錄因子Mef2c和GATA4 mRNA的相對(duì)表達(dá)量，篩選合適的TGF

2、-β2干預(yù)濃度。采用Western blot檢測(cè)H9C2細(xì)胞組蛋白H3乙?；揭阴；疕3(acetylated histone H3，acH3)的差異。染色質(zhì)免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation，CHIP) Real-timePCR檢測(cè)Mef2c和GATA4啟動(dòng)子區(qū)與acH3結(jié)合DNA的相對(duì)表達(dá)水平。比色分析法檢測(cè)TGF-β2對(duì)心肌細(xì)胞的總體組蛋白乙酰化酶(histoneacetyltransfera

3、se，HATs)活性的影響。
　　 結(jié)果:
　　 ①TGF-β2干預(yù)組相對(duì)于對(duì)照組心肌細(xì)胞的增殖能力增強(qiáng)(P＜0.05)。②心肌細(xì)胞的心臟相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Mef2c和GATA4 mRNA的相對(duì)表達(dá)量隨著TGF-β2濃度的升高呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，在5μg/L的濃度時(shí)均達(dá)到最高，Mef2c mRNA相對(duì)表達(dá)量是對(duì)照組的1.8倍，GATA4 mRNA是對(duì)照組的2.3倍(P＜0.05)。③TGF-β2干預(yù)72h后acH3水平是對(duì)