如意珍寶片對腦缺血大鼠運動功能障礙的改善作用鹽酸度洛西汀對大鼠應(yīng)激性胃潰瘍的保護作用機制研究.pdf

1、本研究論文主要分為兩部分:一、如意珍寶片對腦缺血大鼠運動功能障礙的改善作用;二、鹽酸度洛西汀對大鼠應(yīng)激性胃潰瘍的保護作用機制研究
　　一、如意珍寶片對腦缺血大鼠運動功能障礙的改善作用
　　本研究的目的是考察如意珍寶片對局灶性腦缺血大鼠運動功能障礙的影響，并初步探討其可能的作用機制。采用線栓法永久性阻斷大鼠大腦中動脈致局灶性腦缺血(pMCAO)，術(shù)前連續(xù)3d給予如意珍寶片(i.g.)，術(shù)后長期連續(xù)給藥，腦缺血24 h后進行動物

2、神經(jīng)行為評分，ELISA法測定缺血側(cè)腦組織勻漿中TNFα的含量變化，分別于術(shù)后不同時間點進行加速轉(zhuǎn)棍實驗、平衡木實驗、步態(tài)實驗和開闊場實驗評估腦缺血大鼠的運動功能變化，術(shù)后42 d進行TTC染色評估缺血大鼠腦梗死體積的變化。結(jié)果顯示，與模型組相比，腦缺血24 h后如意珍寶片0.5 g·kg-1組和1.0 g·kg-1組大鼠神經(jīng)行為評分分別下降14％和17％，缺血側(cè)腦組織勻漿中TNFα含量分別減少21％和55％;如意珍寶1.0 g·kg-

3、1組大鼠術(shù)后8、14、21、28、42 d加速轉(zhuǎn)棍持續(xù)時間分別延長50％、33％、47％、46％、159％(P＜0.05)，術(shù)后20 d平衡木持續(xù)時間延長71％（P＜0.05），術(shù)后24 d步態(tài)實驗中大鼠后肢步寬明顯縮短24％(P＜0.05)，術(shù)后28 d自主活動總路程無明顯變化，術(shù)后42 d腦梗死體積減少41％(P＜0.05)。以上結(jié)果表明，長期連續(xù)灌胃給予如意珍寶片，可顯著改善大鼠腦缺血后的運動功能障礙，且這種改善作用可能與降低腦組

4、織中的炎癥反應(yīng)有關(guān)。
　　二、鹽酸度洛西汀對大鼠應(yīng)激性胃潰瘍的保護作用機制研究
　　本實驗室前期研究結(jié)果顯示，鹽酸度洛西汀對大鼠應(yīng)激性胃潰瘍具有顯著的保護作用，本研究的目的是分別從氧化應(yīng)激、炎癥、HPA軸等三個方向探討鹽酸度洛西汀對大鼠應(yīng)激性胃潰瘍的保護作用機制。采用水浸拘束應(yīng)激(WIRS)致大鼠應(yīng)激性胃潰瘍，水浸拘束應(yīng)激6h后進行大鼠胃黏膜PAS染色評估胃黏膜黏液屏障變化;生化法測定水浸拘束應(yīng)激6h后大鼠胃黏膜中還原型谷胱

5、甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、總一氧化氮(NO)的含量，以及過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和髓過氧化物酶(MPO)的活性;ELISA法測定水浸拘束應(yīng)激6h后大鼠胃黏膜中TNFα、IL-1β、ICAM-1和NAP-2/CXCL7的含量;Western Blot法測定水浸拘束應(yīng)激6h后大鼠下丘腦中pCREB/CREB、pERK/ERK和pJNK/JNK的表達水平。結(jié)果顯示，(1)與正常

6、組相比，水浸拘束應(yīng)激6h后大鼠胃黏膜PAS染色陽性層顯著減少并出現(xiàn)斷裂，胃黏膜失去完整性和連續(xù)性，提示應(yīng)激后大鼠胃黏膜糖黏蛋白含量降低，胃黏液屏障破壞，胃黏膜出現(xiàn)嚴重損傷;預(yù)先給予鹽酸度洛西汀(20 mg·kg-1，i.p.)可顯著增加胃黏膜PAS染色陽性層厚度，且黏膜保持連續(xù)和完整，有效逆轉(zhuǎn)WIRS所致的大鼠胃黏膜損傷;(2)與正常組相比，水浸拘束應(yīng)激6h后大鼠胃黏膜內(nèi)GSH含量降低23％(P＜0.05)，NO含量減少75％(P＜0.

7、001)，MDA含量增加52％(P＜0.01)，SOD活性降低19％(P＜0.05)，GSH-Px活性降低19％(P＞0.05），CAT活性升高22％(P＜0.05);預(yù)先給予鹽酸度洛西汀(20 mg·kg-1，i.p.)后，WIRS大鼠胃黏膜中NO含量增加85％(P＜0.001)，MDA含量減少104％(P＜0.01)，CAT活性降低160％(P＜0.001)，SOD活性升高71％(P＜0.05)，但對GSH含量及GSH-Px活性無明

8、顯影響;(3)與正常組相比，水浸拘束應(yīng)激6h后，大鼠胃黏膜內(nèi)MPO活性增加47％(P＜0.001)，TNFα含量增加62％(P＜0.05)，IL-1β含量增加42％(P＜0.05)，ICAM-1含量增加58％(P＜0.01)，NAP-2/CXCL7含量增加65％(P＜0.05);預(yù)先給予鹽酸度洛西汀(20 mg·kg-1，i.p.)后，WIRS大鼠胃黏膜中MPO活性降低54％(P＜0.01)，TNFα含量降低81％(P＜0.05)，IL

9、-1β含量降低74％(P＜0.05)，ICAM-1含量降低84％(P＜0.01)，NAP-2/CXCL7含量降低79％(P＜0.05);(4)與正常組相比，水浸拘束應(yīng)激6h后大鼠下丘腦中CREB、ERK和JNK磷酸化水平均顯著增加，其總蛋白表達無明顯變化;預(yù)先給予鹽酸度洛西汀(20 mg·kg-1，i.p.)可顯著降低WIRS大鼠下丘腦CREB和ERK磷酸化水平，但對JNK磷酸化水平無明顯影響，且不影響CREB、ERK和JNK總蛋白的表

10、達水平。以上結(jié)果表明，預(yù)先給予鹽酸度洛西汀(20 mg·kg-1，i.p.)可維持WIRS后大鼠胃黏膜屏障的連續(xù)性和完整性，保護應(yīng)激所致的大鼠胃黏膜損傷，這種保護作用可能是通過抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)、抑制中性粒細胞的激活、降低中性粒細胞-內(nèi)皮細胞的黏附及抑制HPA軸的活性而實現(xiàn)的，而且鹽酸度洛西汀可能是通過抑制下丘腦中ERK磷酸化，進而抑制CREB的磷酸化激活，從而最終調(diào)節(jié)CRF mRNA表達而實現(xiàn)對HPA軸的抑制，從而發(fā)揮對胃黏膜的保護作用