植物血凝素的藥效學(xué)研究及安全性評(píng)價(jià).pdf

1、1、植物血凝素的安全性評(píng)價(jià)植物血凝素(PHA)是從紅蕓豆中提取的植物糖蛋白，即一種低聚糖與蛋白質(zhì)的復(fù)合物，是一種新型的廣譜抗病毒藥，并能增強(qiáng)機(jī)體的免疫能力。本研究對(duì)植物血凝素進(jìn)行了安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，小鼠腹腔注射植物血凝素的半數(shù)致死量LD<,50>為1065 mg/kg·bw，屬于低毒，輕度蓄積毒性；30天亞慢性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，各劑量組脾臟系數(shù)明顯增加(p<0.01)。100 mg/kg·bw劑量組的肝臟系數(shù)與對(duì)照組比差異極顯著(

2、p<0.01)；50 mg/k·bw劑量組的肝臟系數(shù)與對(duì)照組比差異顯著(p<0.05)，中低劑量組(50 mg/kg·bw和10 mg/kg·bw)ALP活性明顯降低(p<0.01)，分別降低了21％和27％。最大無(wú)作用劑量為10 mg/kg·bw；小鼠精子畸形實(shí)驗(yàn)和骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)均為陰性；植物血凝素Ames試驗(yàn)結(jié)果表明：在0。5～5000μg/皿范圍內(nèi)，植物血凝素(PHA)對(duì)鼠傷寒沙門(mén)氏菌TA97、TA98、TA100、TA102四

3、株試驗(yàn)菌株，在加與不加S-9時(shí)，均未見(jiàn)有致基因突變作用，亦無(wú)劑量-反應(yīng)關(guān)系。說(shuō)明植物血凝素?zé)o致突變和遺傳毒性。植物血凝素安全性毒理評(píng)價(jià)初步認(rèn)為其是安全可靠的。 2、植物血凝素對(duì)雞新城疫疫苗免疫和重組禽流感滅活疫苗(H<,5>N<,1>，Re-1株)效果的影響本試驗(yàn)對(duì)免疫增強(qiáng)劑植物血凝素對(duì)雛雞新城疫疫苗免疫效果的影響進(jìn)行了研究。1日齡依莎雄性雛雞200只隨機(jī)分成4組，分別為A、B、C、D(生理鹽水組)，分別于7 d、21 d用接

4、種Ⅳ系Lasota弱毒疫苗，免疫后按照2 mg/kg·bw、1 mg/kg·bw、0.5mg/kg·bw一次肌肉注射植物血凝素。各雞群于免疫后1 w、2 w、3 w、4 w、5 w、7 w、9 w測(cè)定血液中新城疫特異性抗體水平。結(jié)果表明，經(jīng)兩次免疫后，1 mg/kg·bw劑量組免疫器官指數(shù)均高于對(duì)照組，但無(wú)顯著差異；雞血清抗體滴度效價(jià)最高達(dá)9.6log<,2>，比對(duì)照組高出1.4個(gè)滴度(p<0.05)。由此證明PHA能顯著增強(qiáng)雞對(duì)LaS

5、ota活疫苗的免疫反應(yīng)，可以作為高效免疫增強(qiáng)劑。 200只雛雞隨機(jī)分成4組，2周齡時(shí)用重組禽流感滅活疫苗(H<,5>N<,1>，Re-1株)免疫，1～3組于免疫同時(shí)肌肉注射植物血凝素劑量分別為2 mg/kg·bw、1 mg/kg·bw、0.5mg/kg·bw，第4組為溶劑對(duì)照組。各組雞群于免疫后1 w、2 w，各組剖殺5只雞，計(jì)算免疫器官指數(shù)，并于免疫后1w～8w，9w，11w采血測(cè)定AI疫苗的HI效價(jià)。結(jié)果表明，各劑量組的胸

6、腺指數(shù)低于對(duì)照組，但差異不顯著(p>0.05)；1mg/kg·bw組和2 mg/kg·bw組法氏囊指數(shù)顯著升高(p<0.05)。0.5 mg/kg·bw組和1 mg/kg·bw組的脾臟指數(shù)均顯著升高(p<0.05)。1mg/kg·bw劑量組從免疫后第2周開(kāi)始到第7周抗體滴度均顯著高于對(duì)照組(p<0.05)，且第4周和第5周最高達(dá)到7.91og<,2>，比對(duì)照組高出1.6個(gè)滴度(p<0.01)。0.5 mg/kg·bw劑量組第5周和第6周

7、高于對(duì)照組(p<0.05)。2mg/kg·bw組與對(duì)照組差異不顯著(p>0.05)結(jié)論：1 mg/kg·bw增強(qiáng)AI疫苗免疫效果較好。 3、植物血凝素對(duì)人工感染雞新城疫的防治效果研究隨機(jī)挑選160只35日齡雛雞分成4組，即高、中、低劑量組和溶劑對(duì)照組。分別以2 mg/kg·bw、1 mg/kg·bw、0.5 mg/kg·bw和溶劑0.4 mL肌肉注射，連續(xù)3天。注射后三天人工感染雞新城疫病毒，觀(guān)察植物血凝素對(duì)雞ND的預(yù)防效果。