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1、吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文林蛙油小分子肽的制備及其分子量分布研究姓名:孫建忠申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):食品科學(xué)指導(dǎo)教師:胡耀輝20080601PreparationofRanaoviductmicromoleculepeptideandResearchforitsmolecularweightdistributionAbstractInthisstudyRanaoviductwasthesubstrate,caroidalkalinepro
2、teinase,extranase,pepsaseandcompproteasewereemployedtohydrolyzesubstrate,theeffectofenzymolysisWaSdeterminedbydeterminingenzymeactivitysubstrate’Sdegreeofhydrolysisandcontentofacidsolublepeptide、freeaminoacidsinthedigest
3、TheresultWas“theenzymeactivityofcaroidandalkalineproteinasewerehigherthantheotherthreeenzymes,510U/mg350U/mgrespectively;degreeofhydrolysiswashigher,123%and118%respectively;thecontentofacidsolublepeptidecontentWashigherr
4、elatively437%and503%respectively;Thecontentoffreeaminoacidswaslowerrelatively042mg/mLand056%respectivelyInsummarycaroidandalkalineproteinasewereemplyedtoprepareactivepeptideRanaoviductWashydrolyzedbycombinationoftwoenzym
5、esFirstlysubstrateWashydrolyzedbyemployingcaroid,theeffecttodegreeofhydrolysisandfreeaminoacidsindigestbysubstrateconcentration、enzymeamounthydrolytictemperaturepSandhydrolytictimeweredeterminedbysinglefactorexperimentim
6、portantfactorswerescreenedbysinglefactorexperimentThebesttechnologyconditionbyCaroidWas“temperature60℃,pH65,concentrationofsubstraet1%,efflzymeamount15%,hydrolytictime30hOnthebaseoftheaboveexperimentalkalineproteinaseWas
7、empolyedtohydrolysisagainFirstlysinglefactorwasemployed,thanthebesttechnologyconditionbyalkalineproteinaseWatq:temperature50。C,pH80,enzymeamount0875%hydrolytictime30hSubstrate’Sdegreeofhydrolysisandcontentofacidsolublepe
8、ptideindigestreached184%and786%respectivelywhichwas56%and302%higherthansingleenzymehydrolizationThedigestWassegregatedbYSephadexG15gelcolumnPolypeptidemolecularweightbetween300—1355Daoccupied413%ofallelutingpeal【areaindi
9、gestbycaroidhydrolizationhigherthan1355Daoccupied38%,lowerthan300Daoccupied207%Polypeptidemolecularweightbetween3001355Daoccupied382%ofallelutingpeal(areaindigestbYalkalineproteinasehydrolizationhigherthan1355Daoccupied4
10、26‰lowerthan300Daoccupied192%Polypeptidemolecularweightbetween3001355Daoccupied526%ofallelutingpeal【areaindigestbYcombinationoftheabovetwoenzymeshydrolizationhigherthan1355Daoccupied315%,lowerthan300Daoccupied159%Highper
11、formanceliquidchromatographyandlaserdesorptiontimeofflightmassspectrometrywereemployedtoanalyzeanddetectethedigestTherehavebeenthreechromatographicpeatretentiontimewas21837min23300minand24499minbyturnsThecontentofmateria
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