球囊菌(Ascosphaera apis)侵染對意大利蜜蜂免疫反應的影響.pdf

1、白堊病是一種由專性病原真菌蜜蜂球囊菌侵染所產(chǎn)生的蜜蜂幼蟲病。球囊菌唯一的侵染途徑是以孢子形式經(jīng)口攝入并在幼蟲進入中后腸相通的蛹期這一特殊時期進行侵染。當球囊菌孢子進入蜜蜂體內至完成侵染，以細胞免疫和酚氧化酶為代表的體液免疫在蜜蜂個體免疫中的如何變化是未知的。
　　本試驗利用室內人工飼養(yǎng)意大利蜜蜂幼蟲及接種球囊菌孢子技術，探究5日齡初的意大利蜜蜂被接種不同劑量球囊菌孢子（1×107、2.5×107、5×107、1×108孢子數(shù)/mL

2、）后的白堊病感染率，發(fā)現(xiàn)5×107孢子數(shù)/mL有效感染率達到90.00±2.55％。在此基礎上對被球囊菌侵染的蜜蜂個體免疫反應進行初步探究，檢測了蜜蜂血淋巴中血細胞形態(tài)、血細胞總數(shù)、黑化反應、酚氧化酶原基因的轉錄表達相對定量分析。結果顯示：血淋巴中未出現(xiàn)明顯的細胞免疫行為；接種之后24h內的血細胞總數(shù)在接種孢子組和空白對照組之間沒有差異；接種孢子組的血淋巴黑化反應出現(xiàn)早并且程度深；蜜蜂體內酚氧化酶原基因轉錄水平隨著個體發(fā)育的進行呈上升趨

3、勢，接種孢子組蜜蜂體內酚氧化酶原基因轉錄水平的相對表達量在72h內高于空白對照組，第84h則出現(xiàn)降低，并且遠低于空白對照組。
　　本試驗初步探究出了球囊菌侵染對意大利蜜蜂個體免疫反應的影響。球囊菌侵染對被接種球囊菌孢子后蜜蜂的細胞免疫沒有明顯影響；以酚氧化酶原級聯(lián)為主的體液免疫則對球囊菌的侵染產(chǎn)生應答，酚氧化酶催化參與的黑化反應加強；酚氧化酶原基因相對表達量先增加后降低的現(xiàn)象則反映了蜜蜂個體免疫與病原侵染間的抗爭。本試驗為蜜蜂白堊