不同寄主來源的粉紅單端孢比較及活性研究.pdf

1、本論文研究了溫度、pH和營(yíng)養(yǎng)條件對(duì)來源于棉花、葡萄、蘋果和甜瓜的粉紅單端孢(Trichothecium roseum Link)菌絲生長(zhǎng)影響及其分生孢子的致死溫度；并在人工接種的條件下，測(cè)定了不同寄主來源的粉紅單端孢的孢子懸浮液和菌絲塊接種時(shí)對(duì)蘋果的致病力；首次較為系統(tǒng)地研究了粉紅單端孢對(duì)植物病原真菌的拮抗活性及其機(jī)制。主要研究結(jié)果如下： 1．對(duì)粉紅單端孢生物學(xué)特性的研究結(jié)果表明，該菌在10～35℃條件下均能生長(zhǎng)，適宜生長(zhǎng)溫度為

2、15℃至30℃，10℃和35℃時(shí)生長(zhǎng)緩慢，在25℃時(shí)生長(zhǎng)最好，溫度低于5℃或高于40℃菌絲不能生長(zhǎng)。方差分析表明：不同菌株之間，S3與S1、S2、S4間存在極顯著差異。粉紅單端孢在pH值3～11.5之間均能夠生長(zhǎng)，菌絲生長(zhǎng)呈單峰變化。在pH值4.5～7.5之間生長(zhǎng)最好，即在中性偏酸環(huán)境條件下比中性偏堿的條件下菌絲生長(zhǎng)好；不同寄主間比較，來自葡萄的菌株S2生長(zhǎng)最好，來自蘋果的菌株S3生長(zhǎng)較差。不同來源的菌株之間分生孢子致死溫度有差異，S1

3、(棉花)、S3、S4(甜瓜)的分生孢子致死溫度分別為54℃，S2的分生孢子致死溫度分別為52℃。 2．研究了碳氮源營(yíng)養(yǎng)對(duì)粉紅單端孢的影響，結(jié)果表明，該菌對(duì)多種單糖、雙糖和多糖等碳源及有機(jī)氮和無機(jī)氮均能夠利用。就碳源而言，菌絲線性生長(zhǎng)各菌株以在葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基上最快，其次是麥芽糖、甘油、可溶性淀粉、蔗糖，數(shù)據(jù)顯示不同的菌株對(duì)不同碳源的利用稍有差異。方差分析表明，葡萄糖與其他幾種碳源間差異顯著(5％水平)，其他碳源之間差異不顯著

4、。菌株之間的比較，S2與S1、S3、S4間差異極顯著(1％水平)；S3與S1、S2、S4間差異極顯著(1％水平)。液體培養(yǎng)時(shí)，以可溶性淀粉為碳源時(shí)菌絲干重值最大，其次是葡萄糖、甘油、蔗糖、麥芽糖。方差分析表明，可溶性淀粉與葡萄糖、甘油、蔗糖、麥芽糖差異極顯著(1％水平)。就氮源而言，蛋白胨最適合菌絲線性生長(zhǎng)，其次是硝酸銨、硝酸鈉、脲、硫酸銨；方差分析表明，蛋白胨與其他氮源間差異極顯著(1％水平)，其他氮源之間差異不顯著。菌株之間的比較，

5、 S1、S2與S3與S4間差異顯著(5％水平)。液體培養(yǎng)時(shí)以蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基最適合病菌生長(zhǎng)，菌絲干重值最大，其次是脲、硝酸銨、硝酸鈉、硫酸銨。方差分析表明，蛋白胨、脲、硝酸銨和硝酸鈉、硫酸銨、CK之間差異極顯著(1％水平)；硝酸銨、硝酸鈉之間差異不顯著；菌株之間比較，S3與其他菌株間差異極顯著(1％水平)。 3．采用聚丙烯酰胺凝膠電泳方法，分析了6個(gè)不同寄主來源的粉紅單端孢菌株的酯酶同工酶和可溶性蛋白的電泳圖譜。結(jié)果表明，

6、6個(gè)不同來源的菌株的酯酶電泳圖譜有2條共同的酶帶，即Rf0.48和Rf0.64，但不同來源的菌株間譜帶的數(shù)量和強(qiáng)弱有差異；可溶性蛋白電泳圖譜在Rf0.52和Rf0.60有特征譜帶，不同來源的菌株間譜帶數(shù)量和強(qiáng)弱也有差異。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明，同工酶電泳方法簡(jiǎn)單易行，能反映粉紅單端孢種間共同的特征譜帶以及種內(nèi)不同寄主菌株之間的差異，是粉紅單端孢種及種下分類的一個(gè)可行的輔助手段。 4．在人工接種條件下，以蘋果為供試植物材料，測(cè)定了不同來

7、源的粉紅單端孢菌株致病力強(qiáng)弱。用孢子懸浮液創(chuàng)傷接種蘋果，來自棉花的S1菌株致病力明顯強(qiáng)于其它菌株，達(dá)到極顯著水平(1％水平)，其他菌株間差異不顯著；用菌絲塊創(chuàng)傷接種蘋果，來自蘋果的S3菌株造成的病斑明顯大于其它菌株，差異達(dá)到顯著水平(5％水平)。上述結(jié)果表明，不同來源的粉紅單端孢菌株對(duì)同一寄主植物的致病力有顯著差異，也即粉紅單端孢菌株間存在致病力分化現(xiàn)象。菌絲塊創(chuàng)傷接種所致病斑面積比孢子懸浮液創(chuàng)傷接種所致病斑面積大。 5．研究了

8、粉紅單端孢菌對(duì)植物病害的抗菌活性。在PSA平板對(duì)峙培養(yǎng)試驗(yàn)中，粉紅單端孢菌的菌絲生長(zhǎng)速度比棉花黃萎病菌、棉花枯萎病菌、茄褐紋病菌、百合炭疽病菌、水稻惡苗病菌、油菜菌核病菌、草莓灰霉病菌、辣椒灰霉病菌、牡丹根腐病菌等植物病原菌慢，兩者的邊緣很快接觸，沒有抑菌帶出現(xiàn)；有些病原真菌，例如油菜菌核病菌，其生長(zhǎng)速度較快，很快侵占到粉紅單端孢菌菌落周圍，甚至將粉紅單端孢菌落覆蓋。結(jié)果表明，在對(duì)峙培養(yǎng)中，粉紅單端孢菌不具有營(yíng)養(yǎng)和空間競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)，甚至可以

9、說是處于劣勢(shì)。在濾液拮抗試驗(yàn)中，粉紅單端孢菌的發(fā)酵濾液和發(fā)酵滅活濾液均對(duì)供試的植物病原菌表現(xiàn)出強(qiáng)烈的抑制作用：濾液濃度分別在6.25％、12.5％、25％時(shí)，對(duì)油菜菌核病菌的相對(duì)抑菌率分別為40.64％、58.98％、100％；滅活濾液的濃度在6.25％、12.5％、25％時(shí)，對(duì)油菜菌核病菌的相對(duì)抑菌率達(dá)到25.00％、48.75％、100％。濾液和滅活濾液的濃度在6.25％、12.5％、25％時(shí)對(duì)棉花黃萎病菌的相對(duì)抑制率分別達(dá)到14.