安卡紅曲霉產(chǎn)色素與糖化酶的研究.pdf

1、本文對(duì)安卡紅曲霉9311(Monascus anka 9311)液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)色素及糖化酶的培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化，研究了碳源、氮源、裝液量、種齡、接種量等因素對(duì)色素積累及糖化酶活力的影響。通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)確定了最佳培養(yǎng)條件。研究了光照、溫度、pH值對(duì)紅曲色素穩(wěn)定性的影響，優(yōu)化了桔霉素HPLC檢測(cè)條件，測(cè)定了紅曲發(fā)酵液中桔霉素含量。主要研究結(jié)果如下： 1、安卡紅曲霉9311發(fā)酵液最大吸收峰為495 nm和425 nm，所產(chǎn)水溶性色素含量比醇溶

2、性色素高。通過(guò)單因素以及正交實(shí)驗(yàn)，確定安卡紅曲霉93ll的最佳培養(yǎng)條件為溫度32℃，種齡5d，初始pH值5.75。以產(chǎn)色素最佳水平組合A<,1>B<,1>C<,2>D<,3>(甘油10％，蛋白胨1.5％，接種量6％，裝液量85 mL)發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵液色價(jià)為263.5 U/mL；以產(chǎn)酶最佳水平組合A<,1>B<,1>C<, 3>D<,2>(甘油9％，蛋白胨1.5％，接種量7％，裝液量75 mL)發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵液糖化酶活達(dá)到409.6 U/mL

3、；以正交實(shí)驗(yàn)(同時(shí)以色價(jià)和糖化酶活為觀測(cè)值)的最佳水平組合A2BlC2D2(甘油10％，蛋白胨1.5％，接種量6％，裝液量75 mL)發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵液色價(jià)達(dá)260.3 U/mL，糖化酶活為404.0 U/mL。 2、紅曲色素穩(wěn)定性受光照、溫度、pH值等因素的影響。太陽(yáng)光下照射10 d色素保存率僅為20.8％，室內(nèi)自然光下10d色素保存率為86.5％，室溫下閉光保存10d色素保存率為97.0％；溫度對(duì)紅曲色素穩(wěn)定性影響不大，但隨著加

4、熱時(shí)間的延長(zhǎng)，色素穩(wěn)定性會(huì)逐漸降低，40℃、60℃、80℃三個(gè)處理溫度經(jīng)過(guò)12 h，其保存率分別為95.0％，92.0％、90.7％；紅曲色素在pH值5～9之間穩(wěn)定性較強(qiáng)。 3、桔霉素高效液相測(cè)定的色譜條件為：色譜柱，ShimadzeI VP-ODS C<,18>(5μm，150：mm×4.6 mm)；流動(dòng)相，純甲醇；pH值2.5；熒光檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為九ex=331 nm，九em=500 nm；柱溫30℃；流速0.8 mL/m