嗜線蟲(chóng)致病桿菌對(duì)小菜蛾作用方式及殺蟲(chóng)機(jī)理的研究.pdf

1、嗜線蟲(chóng)致病桿菌(Xenorhabdus nematophila)HB310菌株是從河北省土壤中分離的小卷蛾斯氏線蟲(chóng)(Steinernema carpocaposae)腸道內(nèi)所分離到的共生細(xì)菌，該菌株對(duì)多種昆蟲(chóng)具有口服殺蟲(chóng)活性。為探索該菌株直接作為殺蟲(chóng)制劑應(yīng)用于生產(chǎn)的可行性，本研究以蔬菜上重要害蟲(chóng)--小菜蛾為主要試蟲(chóng)，研究了HB310菌液及其殺蟲(chóng)蛋白對(duì)小菜蛾的作用方式，同時(shí)研究了殺蟲(chóng)蛋白對(duì)小菜蛾和棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的作用機(jī)理，為共生菌的開(kāi)發(fā)利用奠

2、定良好的理論基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下： 1．通過(guò)對(duì)昆蟲(chóng)作用方式的研究發(fā)現(xiàn)，HB310菌液及其殺蟲(chóng)蛋白對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)的殺蟲(chóng)作用方式主要是胃毒作用和拒食作用，沒(méi)有觸殺作用，對(duì)成蟲(chóng)產(chǎn)卵也沒(méi)有明顯趨避作用。嗜線蟲(chóng)致病桿菌HB310原菌液對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)具有較強(qiáng)的胃毒殺蟲(chóng)活性，72h小菜蛾2，3，4齡幼蟲(chóng)的校正死亡率分別達(dá)到100％，54.39％，50％；殺蟲(chóng)蛋白粗提物對(duì)小菜蛾2齡幼蟲(chóng)的LC<,50>為0.0461 mg/L；經(jīng)native-PA

3、GE進(jìn)一步純化得到的毒素Ⅱ(51.9 μg/mL)對(duì)小菜蛾2齡幼蟲(chóng)具有較高的口服胃毒活性，72h幼蟲(chóng)死亡率達(dá)73.33％；用亞致死劑量的菌液及其殺蟲(chóng)蛋白粗提物處理小菜蛾2齡幼蟲(chóng)，存活幼蟲(chóng)的化蛹率、蛹重、羽化率、雌蟲(chóng)壽命以及成蟲(chóng)產(chǎn)卵量均明顯下降。 2．HB310菌液既能顯著降低小菜蛾幼蟲(chóng)的孵化率又能顯著降低初孵幼蟲(chóng)的存活率，使幼蟲(chóng)的孵化率降低37％，初孵幼蟲(chóng)的存活率僅為55％；殺蟲(chóng)蛋白粗提物對(duì)幼蟲(chóng)的孵化率沒(méi)有明顯的影響，僅能顯著降

4、低初孵幼蟲(chóng)的存活率。 3．對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)中腸主要蛋白酶活性的測(cè)定結(jié)果表明，毒素Ⅱ能明顯抑制小菜蛾2齡幼蟲(chóng)中腸主要蛋白酶(弱堿性類胰蛋白酶、強(qiáng)堿性類胰蛋白酶和類胰凝乳蛋白酶)活性，隨取食毒素Ⅱ時(shí)間的增加，小菜蛾幼蟲(chóng)體內(nèi)主要蛋白酶活性被抑制的程度逐漸增加；另外，毒素Ⅱ的劑量也影響著其對(duì)以上蛋白酶抑制作用的程度，隨毒素Ⅱ劑量的增加，幾種蛋白酶被抑制的程度增強(qiáng)。毒素Ⅱ?qū)γ掴徬x(chóng)幼蟲(chóng)中腸內(nèi)主要蛋白酶活性有類似的影響。 4．毒素Ⅱ能激活