煙草甲羧酸酯酶和乙酰膽堿酯酶活性的研究.pdf

1、煙草甲Lasiodermaserricorne(Fabrcius)屬鞘翅目竊蠹科，是世界性的儲(chǔ)煙害蟲(chóng)。煙草甲羧酸酯酶(CarE)和乙酰膽堿酯酶(AChE)是與殺蟲(chóng)劑及CO2氣調(diào)防治煙草甲密切相關(guān)的酶類，本文就二者的活性、分布及不同蟲(chóng)態(tài)中和磷化氫、氣調(diào)處理下的變化進(jìn)行了研究。 應(yīng)用正交試驗(yàn)方法研究了CarE酶濃度、底物(a-NA)濃度、反應(yīng)體系的pH、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間等5個(gè)因素對(duì)煙草甲成蟲(chóng)CarE活性檢測(cè)的影響。結(jié)果表明，5個(gè)因

2、素對(duì)煙草甲成蟲(chóng)CarE比活力的測(cè)定都有極顯著影響。在進(jìn)行極差分析、方差分析及多重比較后得到了煙草甲成蟲(chóng)CarE活性測(cè)定的最適條件，即酶的終濃度為1頭/mL、底物的終濃度為5.0×10-4mol/L、pH值7.5、溫度42℃、時(shí)間10min。 研究了煙草甲CarE和AChE的體軀與亞細(xì)胞分布。成蟲(chóng)CarE活性以頭部最高，胸部和腹部的活性次之；老熟幼蟲(chóng)的頭部、胸部和腹部的CarE活性相差不大。成蟲(chóng)及老熟幼蟲(chóng)的AChE均主要分布于頭部

3、，均極顯著高于胸部和腹部。成蟲(chóng)及老熟幼蟲(chóng)的頭部、胸部、腹部各部分差速離心后各亞細(xì)胞組分的CarE均主要集中在胞質(zhì)溶膠層，細(xì)胞核和細(xì)胞碎片層次之，微粒體層和線粒體層分布較少。老熟幼蟲(chóng)、成蟲(chóng)和老熟幼蟲(chóng)的頭部、胸部、腹部各部分差速離心后各亞細(xì)胞組分的AChE比活力均以線粒體層為最高，超過(guò)90％的活性位于有膜的亞細(xì)胞組分中(線粒體層、微粒體層、細(xì)胞核及細(xì)胞碎片層)。 研究了不同蟲(chóng)齡及蟲(chóng)態(tài)煙草甲的CarE和AChE活性分布情況。老熟幼蟲(chóng)的

4、CarE比活力最高，2齡幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)次之，蛹的比活力最低。煙草甲AChE比活力為：2齡幼蟲(chóng)>成蟲(chóng)>老熟幼蟲(chóng)>蛹。 研究了特定濃度磷化氫熏蒸作用下，煙草甲成蟲(chóng)體內(nèi)CarE和AChE活性的變化。磷化氫熏蒸作用下，成蟲(chóng)體內(nèi)CarE活性有升高的趨勢(shì)，表明CarE可能對(duì)磷化氫具有解毒作用。磷化氫對(duì)煙草甲成蟲(chóng)AChE的活性有較明顯的抑制作用；成蟲(chóng)的AChE活性最低值及最大抑制率出現(xiàn)在散氣進(jìn)行的某個(gè)階段。 研究了CO2氣調(diào)對(duì)煙草甲成蟲(chóng)的

5、殺蟲(chóng)作用，及其對(duì)煙草甲成蟲(chóng)CarE和AChE活性的影響。在各CO2濃度下，煙草甲成蟲(chóng)的死亡率隨暴露時(shí)間的延長(zhǎng)而增大；隨CO2濃度的增大，煙草甲成蟲(chóng)的半數(shù)致死時(shí)間縮短。CO2對(duì)煙草甲成蟲(chóng)體內(nèi)CarE有明顯的抑制作用。高濃度CO2，長(zhǎng)時(shí)間暴露條件下，存活的煙草甲成蟲(chóng)體內(nèi)的CarE的活性最高，這表明煙草甲成蟲(chóng)的高耐氣能力與CarE活性高有關(guān)。高濃度CO2對(duì)煙草甲成蟲(chóng)AChE活性有一定的抑制；高濃度CO2，長(zhǎng)時(shí)間暴露條件下，存活煙草甲成蟲(chóng)體內(nèi)的