黃芪改善代謝綜合征大鼠腎臟血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2的表達(dá).pdf

1、目的: 觀察中藥黃芪對代謝綜合征(MS)大鼠腎臟局部血管緊張素系統(tǒng)(RAS)中關(guān)鍵酶血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2(ACE2)、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)以及主要活性物質(zhì)血管緊張素II(AngII)的改善情況，了解其對MS各組分以及腎臟形態(tài)和功能改變的影響，分析ACE2與AngII和MS各組分之間的相關(guān)性，從RAS角度探討MS腎臟損害的發(fā)生機(jī)理和黃芪對MS大鼠腎臟的保護(hù)作用及機(jī)制，為中藥黃芪在MS治療中的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。 方法:

2、 60只SPF級雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為6組，每組10只：A組為正常對照組；B組為果糖誘導(dǎo)的MS模型組；C組為纈沙坦組：MS+纈沙坦20mg/(kg·d)；D組為黃芪低劑量組：MS+黃芪1.5g/(kg·d)：E組為黃芪中劑量組：MS+黃芪3.0g/(kg·d)；F為黃芪高劑量組：MS+黃芪6.0g/(kg·d)。六周末，測定各組大鼠的收縮壓(SBP)、內(nèi)臟脂肪體重比、血甘油三酯(TG)、血游離脂肪酸(FFA)和胰島素敏感指數(shù)(I

3、SI)，探討黃芪和纈沙坦對上述指標(biāo)的影響；檢測各組肌酐、尿素氮評價(jià)腎功能，HE染色觀察腎臟形態(tài)改變；用實(shí)時(shí)定量PCR檢測各組大鼠腎臟ACE2mRNA、ACEmRNA的表達(dá)，免疫組化法測定腎臟ACE2的蛋白含量；用放射免疫法檢測腎臟AngII水平。 結(jié)果: ①M(fèi)S模型組與正常對照組相比，大鼠的SBP(144.5±3.3mmHg vs109.3±5.0mmHg，P=0.000)、內(nèi)臟脂肪體重比(0.044±0.001 vs0

4、.037±0.002，P=0.000)、血TG(1.74±0.10mmol/L vs1.18±0.19mmol/L，P=0.000)和FFA(457.6±49.1μmol/L vs345.0±65.9μmol/L，P=0.000)明顯升高，ISI降低(-5.26±0.16 vs-4.48±0.06，P=0.000)；腎臟AngII升高亦有明顯差異(20.53±1.87pg/mg vs13.38±1.38pg/mg，P=0.000)；AC

5、E、ACE2mRNA表達(dá)分別上調(diào)和下調(diào)約76％、58％(1.76±0.12 vs1.00±0.13，P=0.000；0.42±0.07 vs1.00±0.07，P=0.000)； ②纈沙坦和黃芪低、中、高劑量能不同程度改善MS相關(guān)指標(biāo)：SBP(122.1±4.6mmHg，136.0±3.90mmHg，127.5±3.6mmHg，116.3±4.4mmHg)vs(144.5±3.3mmHg)，P=0.000，P=0.000，P=0

6、.000，P=0.000；內(nèi)臟脂肪體重比(0.041±0.001，0.043±0.001，0.040±0.001，0.038±0.002)vs(0.044±0.001)，P=0.000，P=0.441，P=0.000，P=0.000；血TG(1.52±0.11mmol/L，1.63±0.13mmol/L，1.47±0.09mmol/L，1.27±1.00mmol/L)vs(1.74±0.10mmol/L)，P=0.004，P=0.762

7、，P=0.000，P=0.000；FFA(406.6±41.9μmol/L，429.1±29.0μmol/L，400.1±30.6μmol/L，365.1±27.5μmol/L)vs(457.6±49.1μmol/L)，P=0.043，P=1.000，P=0.013，P=0.060；ISI(-4.97±0.13，-5.13±0.10，-4.81±0.11，-4.64±0.12)vs(-5.26±0.16)，P=0.000，P=0.222

8、，P=0.000，P=0.000。纈沙坦組大鼠腎臟AngII水平較MS組增高(27.47±2.50pg/mg vs20.53±1.87pg/mg，P=0.000)，黃芪能降低腎臟AngII水平(黃芪低劑量組：17.94±1.63pg/mg，黃芪中劑量組：15.90±1.75pg/mg，黃芪高劑量組：13.96±1.36pg/mgvs MS組：20.53±1.87pg/mg，P=0.031，P=0.000，P=0.000)； ③纈

9、沙坦和黃芪增加ACE2mRNA表達(dá)水平(纈沙坦組：0.70±0.08，黃芪低劑量組：0.57±0.09，黃芪中劑量組：0.67±0.08，黃芪高劑量組：0.84±0.10 vs MS模型組：0.42±0.07，P=0.000，P=0.002，P=0.000，P=0.000)和蛋白含量(纈沙坦組：0.29±0.03，黃芪低劑量組：0.22±0.03，黃芪中劑量組：0.27±0.02，黃芪高劑量組：0.38±0.04 vs MS模型組：0.

10、18±0.02，P=0.000，P=0.020，P=0.000，P=0.000)，降低ACEmRNA表達(dá)水平(纈沙坦組：1.36±0.1，黃芪低劑量組：1.53±0.13，黃芪中劑量組：1.33±0.1，黃芪高劑量組：1.17±0.09vs MS模型組：1.76±0.12，P=0.000，P=0.001，P=0.000，P=0.000)； ④多元逐步回歸分析顯示，ACE2與SBP和ISI有線性回歸關(guān)系。 ⑤各組的腎功能指

11、標(biāo)肌酐、尿素氮無明顯差異。腎臟HE染色結(jié)果顯示，藥物干預(yù)組腎小球基底膜和系膜區(qū)的病理形態(tài)改變較模型組減輕。 結(jié)論: MS大鼠腎臟局部ACE2表達(dá)下調(diào)，ACE表達(dá)上調(diào)，兩者表達(dá)水平失衡，腎臟AngII水平增高，MS大鼠腎臟有病理形態(tài)改變；ACE2與SBP和ISI有直線回歸關(guān)系：甘肅黃芪和纈沙坦均可上調(diào)ACE2和下調(diào)ACE的表達(dá)，改善腎臟局部RAS的失平衡，改善MS各指標(biāo)；黃芪可以改善ACE2/ACE表達(dá)和調(diào)節(jié)AngII，延