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文檔簡介
1、目的:(1)觀察復配式粗雜糧對脂代謝紊亂大鼠糞膽汁酸排出量和TC、TG、LDL-C和HDI-C等血脂指標的影響:(2)觀察復配式粗雜糧對膽汁酸代謝限速酶CYP7A1mRNA和其上游調(diào)控受體LXRαmRNA基因表達的影響,探討復配式粗雜糧改善脂代謝紊亂大鼠血脂和膽汁酸代謝的作用機制:(3)探討南京市中老年血脂異常人群和正常人群CYP7Al的基因分型及CYP7Al基因-204C多態(tài)性的突變頻率,了解CYP7Al各基因型與血脂異常的關系,從分
2、子水平闡述中老年人群血脂異常的遺傳學因素及發(fā)病機制。
方法:(1)44只SPF級SD大鼠在實驗前適應性喂養(yǎng)一周后,隨機分為高脂模型對照組、米面組、復配式粗雜糧組和陰性對照組;參照美國營養(yǎng)學會推薦的AIN-93M動物合成飼料配方,在此基礎上適當調(diào)整蛋白質(zhì)和蔗糖的比例,增加飽和脂肪酸含量,制成高脂飼料;同時用粳米粉、面粉和復配式粗雜糧粉代替高脂飼料中蔗糖和淀粉部分,配制成米面組飼料和粗雜糧組飼料。(2)實驗開始后按適應期攝食水
3、平供給飼料,初期給予低于適應期喂養(yǎng)量10-20%的量,并在第1周逐日增加,至第2周達到適應期喂養(yǎng)量,此后維持6周,確保每只大鼠的食物攝取量相同。連續(xù)喂養(yǎng)8周后,測定各組大鼠體重、血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、糞膽汁酸和LXRαmRNA、CYP7AlmRNA表達。(3)運用聚合酶鏈反應-限制性內(nèi)切酶片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)技術(shù),對南京地區(qū)漢族正常人群和血脂異
4、常人群CYP7A1基因A-204C多態(tài)性進行分析,并研究各基因型與南京市中老年人群血脂異常的相關性。
結(jié)果:(1)動物試驗結(jié)果表明,與高脂模型對照組比較,大鼠的體重、血清Tc、TG、LDL-C水平顯著下降,HDL-C水平和糞膽汁酸排出量顯著升高(P<0.05);LXRαmRNA、CYP7A1mRNA表達顯著升高(P<0.05)。(2)血脂異常組人群CYP7Al基因-204C中A等位基因頻率(男女合計)為15.0%,C等位基
5、因頻率(男女合計)為85%1正常對照組人群CYP7A1基因-204C中A等位基因頻率(男女合計)為15.4%,C等位基因頻率(男女合計)為84.6%。差異具無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。血脂異?;颊呓M中AA、AC、CC基因型之間TC的差異有顯著性(p<0.05),同時AA基因型患者的HDL-C,LDL-C水平較AC、CC基因型患者顯著降低(p<0.05)。即AA基因型與血漿HDI-C、LDL-C水平下降存在明顯相關性,AC、CC基因型患
6、者間HDL-C,LDL-C間差異不顯著,但CC、AC、AA各基因型之間HDL-C、LCL-C呈下降趨勢:正常對照組人群中僅CC和AC的TC水平差異有顯著性(p<0.05)。
結(jié)論:(1)復配式粗雜糧對高脂飼料誘導的脂代謝紊亂大鼠具有顯著的改善作用。其機制可能與復配式粗雜糧豐富的營養(yǎng)成份有密切關系,其可能的機制包括:①粗雜糧中所含的大豆異黃酮可以誘導LXRα的表達,與順式作用元件結(jié)合,進而調(diào)控其下游膽固醇7α羥化酶的活性,從
7、而通過膽汁酸合成的經(jīng)典途徑促進動物體內(nèi)膽汁酸合成的增加,即促進膽固醇向膽汁酸的轉(zhuǎn)化,從而促進膽固醇的排泄,最終降低血膽固醇的濃度。②粗雜糧中豐富的膳食纖維可以有效的增加實驗大鼠糞膽汁酸的排出量,使體內(nèi)膽汁酸合成代償性增加,從而促使膽汁酸合成經(jīng)典途徑中限速酶CYP7Al和其上游受體LXRα mRNA表達的增強。使體內(nèi)參與膽汁酸合成的膽固醇量增加,導致血中膽固醇被轉(zhuǎn)運到肝臟中參與膽汁酸的合成,從而可以致使大鼠血中TC、TG和LDL-C水平降
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