復(fù)配式粗雜糧對脂代謝紊亂大鼠膽固醇代謝的調(diào)節(jié)和中老年人HMG-CoA還原酶基因多態(tài)性與血脂異常的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:
　　 (1)了解粗雜糧膳食干預(yù)對脂代謝紊亂大鼠血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、胰島素(INS)、空腹血糖(FBG)、動脈硬化指數(shù)(AI)等的影響,以及對實驗大鼠糞膽汁酸排出量的影響。
　　 (2)觀察粗雜糧膳食干預(yù),對實驗大鼠膽固醇合成限速酶(HMG-CoA)還原酶含量的影響;觀察粗雜糧干預(yù)對大鼠法尼醇X受體(FXR)、膽固醇27α-羥化酶(Cyp27α1)Mrna表達的

2、影響。
　　 (3)闡明粗雜糧膳食干預(yù)對脂代謝紊亂大鼠膽固醇代謝的調(diào)節(jié)機制。
　　 (4)了解南京市中老年人群HMG-CoA還原酶基因的分型及分布頻率,分析HMG-CoA還原酶ScrFI基因多態(tài)性與血脂異常(高膽固醇血癥)的關(guān)系。
　　 方法:
　　 (1)40只清潔級SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周,根據(jù)血脂(TC、TG)HDL-C)水平,隨機分為正常對照組、高脂模型組、米面對照組、粗雜糧干預(yù)組;參照AIN-93

3、M動物合成飼料配方,配制正常對照組飼料、在此基礎(chǔ)上制成高脂模型組飼料、米面對照組飼料和粗雜糧干預(yù)組飼料。
　　 (2)參考大鼠適應(yīng)期攝食量供給飼料,實驗初給予低于適應(yīng)性喂養(yǎng)量10-20％的量,并在第1周逐日增加,至第2周達到適應(yīng)性喂養(yǎng)量;確保每只大鼠的食物攝取量基本相同,維持6周。實驗結(jié)束,采集大鼠股動脈血,脫頸椎處死,并留存肝組織備用。測定各組大鼠的TC、TG、HDL-C、FBG、INS水平及肝組織HMG-CoA還原酶含量;應(yīng)

4、用半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法測定各組實驗大鼠肝臟FXR和Cyp27αl的Mrna表達。
　　 (3)以南京市鼓樓區(qū)45歲以上的中老年人群為研究對象,實施醫(yī)學(xué)體檢;篩選符合研究要求的高膽固醇血癥人群和膽固醇正常人群。
　　 (4)應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性內(nèi)切酶片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)技術(shù),檢測兩組人群的HMG-CoA還原酶基因ScrFI多態(tài)性,并進行相關(guān)分析。
　　 結(jié)果:
　　

5、 (1)粗雜糧干預(yù)組大鼠的FBG、INS、TC、TG、LDL-C水平及AI值顯著低于高脂模型組,米面對照組(p＜0.05),而HDL-C水平顯著升高(p＜0.05);
　　 (2)粗雜糧干預(yù)組大鼠糞膽汁酸的排出量顯著高于高脂模型組、米面對照組、正常對照組(p＜0.05),HMG-CoA還原酶含量顯著低于高脂模型組、米面對照組(P＜0.05)。
　　 (3)粗雜糧干預(yù)組大鼠肝臟FXR-Mrna和Cyp27α1-Mrna表

6、達顯著高于高脂模型組、米面對照組、正常對照組(p＜0.05)。
　　 (4)高膽固醇血癥組aa基因型人群TC水平顯著高于AA基因型人群(p＜0.05),AA基因人群HDL-C顯著低于Aa、aa人群水平(p＜0.05)。膽固醇正常組AA基因人群的AI顯著低于aa型基因人群(p＜0.05)
　　 結(jié)論:
　　 (1)復(fù)配式粗雜糧膳食干預(yù)可以改善脂代謝紊亂大鼠的血脂水平、增加大鼠糞膽汁酸的排出、降低大鼠肝臟HMG-Co

7、A還原酶的含量。
　　 (2)復(fù)配式粗雜糧膳食干預(yù)可以誘導(dǎo)FXR及Cyp27α1的高表達,通過膽汁酸合成替代途徑及經(jīng)典途徑,促進大鼠肝臟膽汁酸合成;促進膽固醇向膽汁酸的轉(zhuǎn)化,從而促進膽固醇排泄,降低機體血漿總膽固醇。
　　 (3)南京市鼓樓區(qū),中老年高膽固醇血癥及膽固醇正常人群HMG-CoA還原酶ScrFI要基因多態(tài)性分析提示,HMG-CoA還原酶基因多態(tài)性可能是高膽固醇血癥發(fā)生的遺傳易感因素之一;HMG-CoA還原酶基