2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、背景:
  三氯乙烯(Trichloroehtylene,TCE)是一種廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)的高分子有機(jī)化合物,其主要用途是在工廠中作為金屬、電子元件的清洗劑和脫脂劑等。隨著TCE接觸人群的不斷增加,以及近幾年工業(yè)生產(chǎn)中對TCE的使用不合理,以及對其管理不當(dāng),使得TCE已經(jīng)嚴(yán)重污染了生活的環(huán)境,例如空氣污染、飲用水污染和土壤污染等,TCE已經(jīng)成為國內(nèi)外危害嚴(yán)重的職業(yè)毒物和環(huán)境污染物。職業(yè)性三氯乙烯暴露能夠?qū)е侣殬I(yè)性三氯乙烯藥疹樣皮炎

2、(Occupational Dermatitis Medicamentosa-like of Trichloroethylene,ODMLT),現(xiàn)今大多認(rèn)為ODMLT是一種由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng),但是其損傷機(jī)制不能單一的用TCE致敏性來解釋。與其他化學(xué)致敏物相比,TCE引起的機(jī)體免疫反應(yīng)更為強(qiáng)烈,提示TCE在具有致敏性之外,還具有免疫毒性。Th1/Th2/Th17/Treg平衡是機(jī)體內(nèi)免疫內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的重要平衡,能夠有效地調(diào)節(jié)免

3、疫防御反應(yīng),與免疫性疾病關(guān)系密切。
  目的:
  本研究通過對不同組別以及時(shí)點(diǎn) TCE染毒小鼠脾臟中Th1,Th2,Th17和Treg細(xì)胞比例,各自特異性表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子(T-bet、GTAT-3、ROR-γt、Foxp3)及分泌的細(xì)胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-17、IL-10),探討 TCE暴露對小鼠Th1/Th2/Th17/Treg細(xì)胞平衡的影響,研究三氯乙烯藥疹樣皮炎的免疫機(jī)制。
  方法:
  選

4、取6-8周清潔級(jí)健康BALB/c雌性小鼠100只,水食充足,飼養(yǎng)一周時(shí)間,然后隨機(jī)分為:空白對照組、溶劑對照組、TCE低劑量組和TCE高劑量組。采用飲水暴露的方法,空白對照組不作任何處理,溶劑對照組喂以1%二甲基亞砜(DMSO),TCE低劑量組與TCE高劑量的濃度分別為2.5mg/ml和5.0mg/ml(TCE用1%DMSO助溶)。TCE染毒后,分別在2、4、8、12、16周五個(gè)時(shí)點(diǎn)處死小鼠,收集小鼠全血,無菌取小鼠脾臟組織。采用流式細(xì)

5、胞術(shù)檢測各組小鼠脾臟中Th1、Th2、Th17和Treg細(xì)胞比例。采用免疫組化的方法檢測各組小鼠脾臟中IFN-γ、IL-4、IL-17和IL-10細(xì)胞因子的表達(dá)。采用熒光定量 PCR檢測細(xì)胞特異性核轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GTAT-3、ROR-γt和Foxp3 mRNA表達(dá)水平。采用ELISA法檢測各組小鼠血清中細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17和IL-10的含量。
  結(jié)果:
  1.小鼠臟器系數(shù)結(jié)果
  在整個(gè)實(shí)

6、驗(yàn)過程中,小鼠狀態(tài)良好,未出現(xiàn)染毒死亡狀態(tài)。臟器系數(shù)結(jié)果顯示:溶劑對照組與空白對照組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與溶劑對照組相比,TCE低劑量組小鼠的臟器系數(shù)無明顯變化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。TCE高劑量組中,2、12、16周時(shí),脾臟系數(shù)無明顯變化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);而在4W與8W時(shí),小鼠的脾臟系數(shù)顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  2.脾臟組織中細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4

7、、IL-17和IL-10的表達(dá)情況
  檢測小鼠小鼠脾臟中IFN-γ、IL-4、IL-17和IL-10細(xì)胞因子的表達(dá),免疫組化結(jié)果顯示:與空白對照組相比,溶劑對照組中各細(xì)胞因子表達(dá)水平無明顯變化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在TCE低劑量組中,在4、8、12周時(shí),IFN-γ和IL-4的表達(dá)水平顯著升高,IL-10的表達(dá)水平顯著降低,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);而IL-17在各時(shí)間點(diǎn)均呈顯著升高趨勢,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

8、義(P<0.05)。在TCE高劑量組中,IFN-γ在4、8、12周時(shí)表達(dá)水平顯著升高,IL-4在2、4、8、12周時(shí)表達(dá)水平明顯增高,而IL-17與IL-10的表達(dá)水平在各時(shí)點(diǎn)均顯著變化,IL-17顯著升高而IL-10顯著下降,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),并且其改變趨勢較TCE低劑量組更為明顯。
  3.脾臟組織中Th1、Th2、Th17和Treg細(xì)胞比例結(jié)果
  用流式細(xì)胞術(shù)檢測小鼠脾臟Th1、Th2、Th17和

9、Treg細(xì)胞比例,結(jié)果顯示:溶劑對照組與空白對照組相比,各細(xì)胞比例無明顯變化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在TCE低劑量組中,Th1、Th2、Th17和Treg細(xì)胞比例于溶劑對照組相比均發(fā)生了顯著改變,其中Th2和Th17細(xì)胞比例顯著上升,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05);Th1細(xì)胞在2、4、8、12周時(shí),比例均出現(xiàn)明顯上升情況,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);Treg細(xì)胞比例顯著下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在

10、TCE高劑量組中,各細(xì)胞比例的也發(fā)生了顯著改變,而且改變趨勢較低劑量組更為明顯,Th1、Th2和Th17細(xì)胞比例在個(gè)時(shí)間點(diǎn)均呈上升趨勢,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),Treg細(xì)胞比例在各時(shí)間點(diǎn)均顯著下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  4.脾臟組織中Th1/Th2/Th17/Treg平衡改變結(jié)果
  Th1/Th2/Th17/Treg細(xì)胞平衡的結(jié)果顯示:與空白對照組相比,溶劑對照組無明顯變化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

11、(P>0.05)。TCE處理組與溶劑對照組相比,Th1/Th2比例明顯下降而Th17/Treg比例明顯上升,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且高劑量組比低劑量組的改變趨勢更為明顯。
  5.脾臟組織中核轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GTAT-3、ROR-γt和Foxp3 mRNA表達(dá)水平
  熒光定量PCR結(jié)果顯示:溶劑對照組中的各核轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)水平與空白對照組相比無明顯變化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在TCE低劑量組中

12、,T-bet和ROR-γt分別在4、8、12周時(shí)表達(dá)水平有顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);GATA-3在2、4、8、12周時(shí)的表達(dá)水平有明顯增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);而在8、12周時(shí),F(xiàn)oxp3的表達(dá)水平明顯下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在TCE高劑量組中,T-bet的表達(dá)水平與低劑量組相同,在4、8、12周時(shí)顯著上升,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);GATA-3在各時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)水平有明顯增

13、高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);ROR-γt和Foxp3在4、8、12、16周時(shí)的表達(dá)水平均有顯著改變,ROR-γt顯著升高而Foxp3顯著下降,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  6.脾臟組織中T-bet/GTAT-3/ROR-γt/Foxp3比例的結(jié)果
  結(jié)果顯示:與空白對照組相比,溶劑對照組中T-bet/GTAT-3與ROR-γt/Foxp3無明顯變化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。TCE處理組與

14、溶劑對照組相比,T-bet/GTAT-3比例在中各時(shí)間點(diǎn)均顯著降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);ROR-γt/Foxp3比例在4、8、12、16周時(shí)均顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),并且其下降的趨勢在TCE高劑量組中更為明顯。
  結(jié)論:
  1、TCE具有免疫毒性,通過染毒后能夠改變小鼠免疫臟器中Th1、Th2、Th17和Treg細(xì)胞的數(shù)量比例。
  2、染毒過程中TCE引起小鼠體內(nèi) Th1/T

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