刺五加皂甙誘導人肝癌細胞株SMMC-7721凋亡的研究.pdf

1、佳木斯大學碩士學位論文刺五加皂甙誘導人肝癌細胞株SMMC-7721凋亡的研究姓名：杜愛林申請學位級別：碩士專業(yè)：遺傳學指導教師：呂學詵20050701碩士研究生論文中文摘要目的：探討刺五加皂甙對體外培養(yǎng)人肝癌細胞株S M M C 一7 7 2 1 凋亡的影響。方法：將刺五加皂甙以不同濃度和時間作用于肝癌S M M C - - 7 7 2 1 細胞，采用臺盼藍活細胞拒染法汜活細胞數(shù)；M T T 比色法觀察細胞毒性：采用H E 染色法、觀察

2、細胞凋亡的形態(tài)：原位末端標記法( T U N E L 法) 檢測細胞凋亡率；采用瓊脂糖凝膠電泳法觀察D N A 降解：采用免疫組化法檢測b c l 一2 蛋白和b a x 蛋白的表達。結(jié)果：刺五加皂甙以劑量依賴和時間依賴的方式抑制S M M C ．7 7 2 1 細胞的生長。H E 染色觀察到細胞皺縮、核質(zhì)濃縮、核碎裂、細胞起泡以及凋亡小體形成等凋亡特性的形態(tài)學改變。濃度為0 ．2 5 m g ／m l 、O ．5 m g ／m l 、

3、1 ．0 m g ／m l 的刺五加皂甙處理1 2 h 后，細胞凋亡率分別為( 7 ．5 0 0 ±0 ．9 2 5 8 ) ％，( 1 3 ．8 7 5 ±1 ．1 2 6 0 ) ％( 3 0 ．6 2 5 ±2 ．6 6 9 3 ) ％，與對照組( 2 ．2 5 0 ±I ．0 3 5 1 ) ％比較均有顯著性差異。2 4 h后的細胞凋亡率分別為( 1 3 ．6 2 5 ±1 ．0

4、 6 0 7 ) ％，( 2 1 ．7 5 0 ±1 ．4 8 8 0 ) ％，( 4 5 ．2 5 0±2 ．4 9 2 8 ) ％，4 8 h 后的細胞凋亡率分別為( 1 8 ．1 2 5 ±2 ．0 3 1 0 ) ％，( 3 1 ．0 0 0 - 4 -3 ．5 4 5 6 ) ％，( 5 3 ．3 7 5 ±3 ．2 4 8 6 ) ％，與對照組( 3 ．8 7 5 ±O ．8

5、 3 4 5 ) ％和( 4 ．3 7 5 ±1 ．0 6 0 7 ) ％比較均有顯著性差異。D N A 電泳出現(xiàn)梯狀改變，b c l 一2 蛋白的表達顯著下降，b a x 蛋白的表達明顯升高，呈現(xiàn)時間劑量依賴性。結(jié)論：刺五加皂甙抑制人肝癌細胞株S M M C - 7 7 2 1 的增殖，誘導細胞凋亡。誘導細胞凋亡與b e l —2 蛋白的表達顯著下降，b a x 蛋白的表達明顯升高有關(guān)，呈現(xiàn)時間劑量依賴性。為臨床治療肝癌提供