人參環(huán)氧炔醇對(duì)人肝癌細(xì)胞株HepG2、SMMC-7721的誘導(dǎo)分化作用.pdf

1、目的:探討人參環(huán)氧炔醇對(duì)人肝癌細(xì)胞株HepG2、SMMC-7721的生長(zhǎng)抑制及誘導(dǎo)分化作用。
　　方法:(1)以MTT法、光鏡、透射電鏡觀察人參環(huán)氧炔醇對(duì)HepG2、SMMC-7721人肝癌細(xì)胞增殖、形態(tài)及超微結(jié)構(gòu)的影響。
　　(2)用ELISA法檢測(cè)細(xì)胞質(zhì)中甲胎蛋白含量、溴甲酚綠比色法測(cè)定白蛋白含量、重氮反應(yīng)比色法測(cè)定γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶活力、比色法測(cè)定堿性磷酸酶活性的變化。
　　(3)流式細(xì)胞儀檢測(cè)用人參環(huán)氧炔醇處理前

2、后的細(xì)胞周期變化。
　　(4)RT-PCR法檢測(cè)不同濃度人參環(huán)氧炔醇處理上述肝癌細(xì)胞株后Id1、Id2、p21基因表達(dá)水平的變化。
　　(5)Western-blot法檢測(cè)用藥前后p21、Rb蛋白表達(dá)水平的變化。
　　結(jié)果:人參環(huán)氧炔醇以時(shí)間和劑量依賴性方式抑制人肝癌細(xì)胞株HepG2、SMMC-7721的細(xì)胞增殖;6μmol/L人參環(huán)氧炔醇作用4天,能有效改變肝癌細(xì)胞惡性形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)特征;4～8μmol/L人參環(huán)氧炔

3、醇處理后HepG2、SMMC-7721細(xì)胞AFP分泌量和γ-GT活性明顯降低,白蛋白分泌量及堿性磷酸酶活性上升。細(xì)胞周期分析結(jié)果顯示G0/G1期細(xì)胞數(shù)增加,S期減少,提示人參環(huán)氧炔醇可將細(xì)胞周期阻滯于G1期。人參環(huán)氧炔醇還使細(xì)胞周期正調(diào)節(jié)因子IdmRNA表達(dá)減弱,使負(fù)調(diào)節(jié)因子p21和抑癌基因Rb的基因和蛋白水平表達(dá)均增加。
　　結(jié)論:低劑量人參環(huán)氧炔醇能有效誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞HepG2、SMMC-7721向正常細(xì)胞分化,其機(jī)制可能與通過(guò)