Chk1和Rad51在食管鱗狀細胞癌中的表達及意義.pdf

1、目的:食管鱗狀細胞癌(esophageal squamous cell carcinoma，ESCC)是最常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一。我國是食管癌的高發(fā)地區(qū)，每年新發(fā)病人數(shù)占世界食管癌發(fā)病人數(shù)的一半以上。中國境內(nèi)約80％的食管癌患者發(fā)生在太行山區(qū)，包括河北的磁縣、涉縣、武安和河南的林州等地，是食管癌的集中高發(fā)區(qū)，也是世界食管癌的第一高發(fā)區(qū)，嚴重地威脅著人民的健康。
　　細胞周期檢測點激酶1（checkpoint kinase1，

2、Chk1），是生物進化過程中非常保守的蛋白激酶。作為在進化上比較保守的絲氨酸/蘇氨酸激酶，不僅是細胞分裂過程中所必須，而且對于細胞分裂過程中保持基因的穩(wěn)定也非常重要。Rad51基因是細胞DNA損傷后同源重組修復系統(tǒng)中的重要成員，對于維持基因的穩(wěn)定性，保證生物特性持續(xù)、穩(wěn)定的遺傳起著重要的作用。
　　本項研究應用RT-PCR和免疫組織化學方法檢測Chk1和Rad51mRNA和蛋白在食管鱗癌及癌旁組織中的表達，并結(jié)合臨床資料評價其表達

3、與組織分級和臨床分期之間的關(guān)系，為進一步研究食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展機制提供參考依據(jù)，并為食管鱗癌的預防、診治提供臨床指標。
　　方法:
　　1.應用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(reverse transcription polymerase chainreaction，RT-PCR)法檢測96例食管鱗狀細胞癌組織及相應癌旁非腫瘤組織中CHK1和Rad51基因的mRNA表達情況。
　　2.應用免疫組織化學(immunohistoc

4、hemistry, IHC) SP法檢測96例食管鱗狀細胞癌組織及相應癌旁非腫瘤組織中Chk1和Rad51蛋白的表達情況。
　　3.運用統(tǒng)計軟件SPSS12.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。
　　結(jié)果:
　　1.Chk1和Rad51基因mRNA的表達
　　1.1 Chk1 mRNA的表達Chk1基因mRNA在食管癌和癌旁組織的表達量分別為0.626±0.271和0.317±0.192，食管癌組織中mRNA的表達量明顯高于

5、癌旁常組織，兩者的差異有統(tǒng)計學意義(t=6.382，P=0.000＜0.01)。
　　在ESCC組織中，Chk1 mRNA表達與患者的性別、年齡無關(guān)(P＞0.05);按腫瘤病理學分級，Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ級組Chk1 mRNA表達量分別為0.462±0.250、0.477±0.265、0.818±0.333，Ⅰ、Ⅱ級組mRNA的表達經(jīng)統(tǒng)計學分析與Ⅲ級組具有顯著性差異，(t=10.627，P=0.000＜0.01);有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(0.875

6、±0.235)Chk1 mRNA表達量比無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(0.602±0.274)明顯增高，經(jīng)統(tǒng)計學分析，兩組之間具有顯著性差異(t=4.018，P=0.025＜0.05)。Chk1 mRNA在深層浸潤組癌組織中相對表達量(0.957±0.109)高于淺層浸潤組(0.694±0.034)，經(jīng)統(tǒng)計學分析，兩組之間具有非常顯著性差異(t=12.276，P=0.000)。
　　1.2 Rad51mRNA表達Rad51基因mRNA在食管癌和

7、癌旁組織中的相對表達量分別為0.783±0.358、0.414±0.278，前者明顯高于后者，經(jīng)統(tǒng)計學分析，兩組的差異有統(tǒng)計學意義(t=4.510，P=0.003＜0.05)在ESCC組織中，Rad51 mRNA表達與患者的性別、年齡無關(guān)(P＞0.05);按腫瘤病理組織學分級，Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ級之間組mRNA表達量經(jīng)統(tǒng)計學分析沒有明顯差異(t=1.081，P=0.08＞0.05);在有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分組中，經(jīng)統(tǒng)計學分析，兩組之間無顯著性差異（t

8、=0.981，P=0.195＞0.05）。Rad51 mRNA在深層浸潤組癌組織中相對表達量(0.841±0.304)高于淺層浸潤組(0.608±0.310)，經(jīng)統(tǒng)計學分析，兩組之間具有顯著性差異(t=5.081.，P=0.004＜0.05)。
　　2. Chk1和Rad51蛋白的表達
　　2.1 Chk1蛋白的表達Chk1在ESCC組織中的表達陽性率為67.71％(65/96)，在癌旁組織中的表達陽性率為29.17％(28

9、/96)。ESCC組織中Chk1蛋白的陽性表達率明顯高于癌旁組織，經(jīng)統(tǒng)計學分析有非常顯著差異（X2=15.834 P＜0.01）
　　Chk1蛋白的表達與患者的性別、年齡無關(guān)（P＞0.05）;按腫瘤病理組織學分級，Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ級蛋白陽性表達率分別為57.14％(20/35)、64.71％(22/34)、85.19％(23/27)，Ⅰ+Ⅱ級組的表達率顯著低于Ⅲ級組，經(jīng)統(tǒng)計學分析具有顯著差異（X2=5.248，P=0.022＜0.05）

10、;無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組Chk1蛋白表達率為47.73％(21/44)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的蛋白表達率為84.62％(44/52)，經(jīng)統(tǒng)計學分析，兩組之間有顯著性差異(X2=14.833，P=0.000＜0.01)。Chk1蛋白在深層浸潤組癌組織中的陽性表達率為76.39％(55/72)，高于淺層浸潤組的陽性表達率41.67％(10/24)，經(jīng)統(tǒng)計學分析，兩組之間具有非常顯著性差異（X2=9.926，P=0.002＜0.01）。
　　2.2

11、Rad51蛋白的表達在ESCC組織中Rad51蛋白陽性表達率為58.33％(56/96)，而對應的癌旁組織中的陽性表達率為31.25％(30/96)，經(jīng)統(tǒng)計學分析ESCC組織的陽性表達率顯著高于癌旁組織（X2=14.238，P=0.000＜0.01）。
　　在ESCC組織中，Rad51蛋白表達與患者的性別、年齡無關(guān)(P＞0.05);按腫瘤病理組織學分級，Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ級組Rad51蛋白表達陽性率分別為51.43％(18/35)、61.

12、76％(21/34)、62.96％(17/27)，三組之間蛋白表達陽性率有增高的趨勢，經(jīng)統(tǒng)計學分析，三組之間沒有明顯差異(X2=1.089，P=0.580＞0.05);有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組Rad51陽性表達率為61.54％(32/52)比無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的54.55％(24/44)稍有增高，經(jīng)統(tǒng)計學分析，兩組之間無顯著性差異（X2=0.480，P=0.489＞0.05）。Rad51蛋白在深層浸潤組癌組織中陽性表達率為61.11％(44/72);

13、淺層浸潤組陽性表達率為50.00％(12/24)，經(jīng)統(tǒng)計學分析，兩組之間未見顯著性差異(X2=0.914，P=0.339＞0.05)。
　　3.ESCC組織中Chk1蛋白和Rad51蛋白表達的相關(guān)性分析在ESCC組織中，Chk和Rad51蛋白表達呈正相關(guān)(r=0.481，P=0.026＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.食管癌組織中Chk1和Rad51的mRNA和蛋白表達明顯增高，可能和食管癌的發(fā)生有關(guān)。
　　2