外陰白色病變皮損cyclin D1、CDK4、p21及細(xì)胞增殖指數(shù)的研究及中藥療效觀察.pdf

1、目的：外陰白色病變，屬病因不明的外陰色素減退疾病，包括外陰鱗狀上皮細(xì)胞增生和硬化性苔癬等。曾被稱為慢性外陰營養(yǎng)不良，為婦科常見難治性疾病。國外統(tǒng)計(jì)本發(fā)病率為1/300～1/1000,占外陰疾病的50％，國內(nèi)無此方面的報(bào)道。本病多發(fā)生于中青年女性，主要表現(xiàn)為皮膚粘膜變白、變薄、干燥，易皸裂，伴程度不等的瘙癢；硬化萎縮型患者由于患處皮膚黏膜失去彈性、萎縮，可導(dǎo)致陰道口攣縮狹窄；本病的病因不清，發(fā)病機(jī)理尚不明了，無特異的治療方法，本病易遷延，

2、常給患者帶來巨大的痛苦。中醫(yī)藥治療顯示有較好療效，但缺乏客觀實(shí)驗(yàn)室評價(jià)指標(biāo)。以往認(rèn)為本病是一種癌前病變，目前國內(nèi)外一些學(xué)者的調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，本病癌變率并不高，絕大多數(shù)為非癌前病變，但仍存在爭議。近年來的研究顯示細(xì)胞周期的調(diào)控與細(xì)胞癌變之間存在密切的關(guān)系，一些腫瘤的細(xì)胞周期各階段的調(diào)控因子都有不同程度的異常，它們或作為原癌基因或作為抑癌基因而起作用。目前對外陰白色病變的研究，僅局限于原位癌基因，或與人乳頭瘤病毒關(guān)系的研究，有關(guān)細(xì)胞周期素的研

3、究較少。細(xì)胞周期蛋白D1(cyclinD1)、細(xì)胞周期蛋白激酶(cyclinkinase4,CDK4)、細(xì)胞周期蛋白激酶抑制因子p21，細(xì)胞增殖指數(shù)是重要的細(xì)胞周期調(diào)控因子或細(xì)胞周期指標(biāo)，本實(shí)驗(yàn)擬分別采用免疫組化和流式細(xì)胞術(shù)(FCM)的方法對外陰白色病變患者皮損中的這些指標(biāo)進(jìn)行檢測，從分子水平探討外陰白色病變的發(fā)病機(jī)理，以及本病癌變可能性。同時(shí)，應(yīng)用中醫(yī)藥理論對外陰白色病變患者辯證施治，給予中藥內(nèi)服加外用熏洗，觀察臨床療效和治療前后病變

4、細(xì)胞增殖指數(shù)的變化，尋找評價(jià)藥物療效的客觀的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，為外陰白色病變的防治提供理論基礎(chǔ)。 方法：外陰白色病變皮損標(biāo)本來源于2003年1月～2004年9月河北醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)院婦產(chǎn)科和皮膚科門診就診患者。根據(jù)1976年國際外陰疾病年會(huì)(ISSVD)制定的標(biāo)準(zhǔn)診斷的WLV患者共39例，年齡20～55歲，平均39.69歲；病期3～11個(gè)月，平均為5.57個(gè)月。征得患者同意，在治療前和治療結(jié)束后于局麻下在皮損部用環(huán)鉆取材，立即放入10％福

5、爾馬林溶液內(nèi)，石蠟包埋后備用。所有患者近1個(gè)月內(nèi)未曾接受任何治療，且均無其它全身性疾病和感染表現(xiàn)。給予患者中藥內(nèi)服和外用，3個(gè)月為一個(gè)療程。 外陰鱗癌皮損標(biāo)本10例，來源于2000年1月～2004年9月河北醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)院婦產(chǎn)科和皮膚科門診就診患者。 正常對照組標(biāo)本取自婦產(chǎn)科患者和外科外傷患者腹部正常皮膚20例。 以上標(biāo)本分別采用免疫組化和流式細(xì)胞術(shù)對皮損中cyclinD1、CDK4、p21的表達(dá)進(jìn)行測定，并用后種

6、方法進(jìn)行細(xì)胞增殖指數(shù)檢測。 結(jié)果：1常規(guī)組織病理檢查：39例WLV患者中，外陰鱗狀上皮細(xì)胞增生19例，表現(xiàn)為表皮角化過度，棘層肥厚，上皮突向下延伸，真皮淺層有不同程度的淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤；硬化性苔癬10例，表現(xiàn)為表皮萎縮伴基底細(xì)胞液化變性，黑素細(xì)胞減少，上皮突變鈍或消失，真皮淺層膠原纖維均質(zhì)化，真皮中層淋巴細(xì)胞浸潤；混合型6例，病理表現(xiàn)同時(shí)具有上述兩種病變表現(xiàn)；不典型增生4例，表現(xiàn)為不典型細(xì)胞增生，胞核大而不規(guī)則，染色深，細(xì)胞

7、排列紊亂，失去極性，個(gè)別細(xì)胞角化不良，并可見核絲分裂相，基底細(xì)胞層中胞核聚集。 2免疫組化結(jié)果：外陰白色病變中cyclinD1、CDK4、p21表達(dá)主要分布于表皮層，僅有少數(shù)增生型外陰白色病變的真皮中可見少量分布。皮損中cyclinD1、CDK4、p21表達(dá)均明顯高于正常對照組，和外陰鱗癌組相比，不典型增生組表達(dá)無差別，其余三型均明顯低于該組。 3流式細(xì)胞分析結(jié)果：cyclinD1、CDK4、p21的結(jié)果與免疫組化測定結(jié)

8、果相一致。皮損細(xì)胞增殖指數(shù)明顯高于正常對照組，除了不典型增生組表達(dá)無差別，其余三型均明顯低于外陰鱗癌組。 4臨床療效：痊愈8例；顯效20例；有效10例；無效1例。并且治療后增殖指數(shù)較治療前降低。 結(jié)論：本研究結(jié)果顯示：1cyclinD1、CDK4、p21表達(dá)主要分布于表皮層。采用免疫組化和流式細(xì)胞術(shù)檢測的cyclinD1、CDK4、p21結(jié)果是一致的，在患者各型中的表達(dá)均高于正常，和外陰鱗癌組相比，不典型增生組表達(dá)無差別