河南食管-賁門癌高發(fā)區(qū)居民食管-賁門癌全基因組雜交分析.pdf

1、鄭州大學博士學位論文河南食管賁門癌高發(fā)區(qū)居民食管賁門癌全基因組雜交分析姓名：秦艷茹申請學位級別：博士專業(yè)：消化內(nèi)科指導(dǎo)教師：王立東2003.5.25綜述：食管癌比較基因組雜交I綜述：食管癌比較基因組雜交食管癌(Esophagealcarcinoma，EC)是世界上六大惡性腫瘤之一。占中國惡性腫瘤死亡的第二位。它主要有食管鱗癌和食管腺癌兩種形式，在中國食管腺癌只占食管癌的o4％I”。它的發(fā)生和發(fā)展有顯著的地域性差異。世界上50％的食管癌發(fā)

2、生在中國。河南林縣是食管癌高發(fā)區(qū)之一，由于發(fā)現(xiàn)較晚和治療效果差，其死亡率男性為151／100000，女性為115／100000”l。食管癌發(fā)生的家族集聚性、種族差異性、性別差異性等特點，提示遺傳因素在食管癌的發(fā)生中起～定的作用。多項研究表明食管癌的發(fā)生和演變涉及多種染色體異常的積累，這些染色體異常區(qū)可能含有食管癌相關(guān)基因。通過比較基因組雜交(comparativegenomichybridization，CGH)【4l技術(shù)檢測染色體的異

3、常有助于尋找和定位食管癌相關(guān)基因，從而闡明食管癌癌變機制。I1比較基因組雜交技術(shù)CGH是一種改進的熒光原位雜交。CGH把腫瘤基因組DNA(testDNA)與正常參照組DNA(referenceDNA)分別用切El平移標記上不同的熒光素，通常腫瘤DNA用SpectrumGreendUTP標記為綠色，正?；蚪MDNA用SpectrumRed—dUTP標記為紅色，并將二者以J：1比例混合后制備成探針，同時與正常人外周血的有絲分裂中期染色體進行

4、原位雜交。通過檢測兩種顏色的熒光強度，根據(jù)兩種顏色的比率情況來顯染色體的結(jié)構(gòu)狀況，如發(fā)現(xiàn)兩種顏色比率改變，則說明該區(qū)域存在DNA序列的缺失或擴增。CGH在一次實驗中即可對整個基因組進行檢測，與需要分離DNA并且檢測染色體上的等位基因缺失(LOH)、突變、擴增等傳統(tǒng)分子遺傳學檢測手段相比，該方法即節(jié)省了操作步驟，又能將檢測出的異常DNA序列在染色體上定位，便于進一步通過FISH分析和定位克隆等技術(shù)篩選出相關(guān)基因。CGH能夠檢測數(shù)百kb至數(shù)