青果總黃酮的提取分離及藥效學(xué)研究.pdf

1、目的：以新鮮青果為研究對象,在前人的研究基礎(chǔ)上,首先對青果總黃酮有效成分的提取和純化方法及條件進(jìn)行篩選,及其含量測定;同時根據(jù)青果的藥理作用,對純化后的青果總黃酮,以小鼠為研究對象進(jìn)行急性毒性、抗炎及鎮(zhèn)痛實驗研究;及其體外抗氧化實驗研究,旨在青果總黃酮的進(jìn)一步分離及制備單體的研究提供物質(zhì)基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。
　　方法：在前期的研究基礎(chǔ)上,首先采用最佳的提取方法從青果中提取總黃酮類物質(zhì);并對其黃酮類物質(zhì)粗提物進(jìn)行純化研究,篩選最佳分離條

2、件;根據(jù)理化鑒別和紫外光譜檢測其純化物中具有黃酮類物質(zhì)的理化特征和光譜特征,可確定青果純化物可能是黃酮類。其次采用紫外-可見分光光度法對粗提取物和純化后的青果總黃酮進(jìn)行含量測定。最后,把得到的青果總黃酮進(jìn)行毒理學(xué)研究,青果總黃酮以最大濃度及最大給藥體積的藥液對實驗組小鼠灌胃給藥,對照組給予等體積的溶媒,連續(xù)觀察7d;通過小鼠醋酸扭體法和小鼠熱板法,觀察青果總黃酮對小鼠的鎮(zhèn)痛作用;并采用蛋清致小鼠足跖腫脹、二甲苯致小鼠耳廓腫脹、醋酸致小鼠

3、毛細(xì)血管通透性增加三種模型研究青果總黃酮的抗炎作用;及采用鄰二氮菲-Fe2+氧化法、鄰苯三酚自氧化法、普魯士蘭法三種方法分別測定青果中總黃酮對羥自由基、超氧陰離子的清除能力及總還原能力。
　　結(jié)果：青果總黃酮的最佳提取工藝是取青果粗粉,按照固液比1:10加入70％乙醇在70℃水浴中回流加熱3小時,濾渣重復(fù)提取3次,合并濾液,過濾回收溶劑。最佳純化藝是將提取物上聚酰胺柱,用水洗至無色,再用10％,30％,70％,以3 BV/h速度洗

4、脫,收集溶液,回收溶劑,加壓干燥即可。青果總黃酮未見任何急性毒性反應(yīng),小鼠灌胃青果總黃酮的最大耐受量為11.46g·kg-1,約相當(dāng)于成人臨床日用量的115倍;青果總黃酮能減少醋酸致小鼠的扭體次數(shù),提高小鼠熱板致痛閾值。青果總黃酮對二甲苯致小鼠耳廓腫脹、蛋清致小鼠足跖腫脹、醋酸致毛細(xì)血管通透性增加等急性炎癥模型均有抑制作用。還具有清除羥自由基和超氧陰離子的能力及一定的總的還原能力。
　　結(jié)論：通過對青果總黃酮提取和純化條件的篩選,