藥用植物北細(xì)辛(Asarum heterotropoides)愈傷組織培養(yǎng)及不定根的誘導(dǎo).pdf

1、作為東北地區(qū)重要的中草藥北細(xì)辛用于治療病患已有千年歷史，臨床上療效卓著。由于近年來頻繁應(yīng)用于中醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)，對(duì)正品細(xì)辛的需求不斷增加，一定程度上造成了對(duì)天然資源的掠奪性開發(fā)，使其野生資源面臨枯竭。與常規(guī)的人工栽培相比，組織培養(yǎng)途徑具有周期短，且不受四季氣候限制，無重金屬、農(nóng)藥等有害物質(zhì)的污染，因此越來越受到人們的關(guān)注，被認(rèn)為是一種極有希望的大規(guī)模生產(chǎn)其藥用部位及其次生代謝產(chǎn)物的重要途徑。本研究以北細(xì)辛地上部分（葉片和葉柄）、地下部分（根和根

2、狀莖）為外植體，探討不同種類植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)愈傷組織及不定根誘導(dǎo)的影響，同時(shí)以高效液相色譜法(HPLC)檢測揮發(fā)油中有效成分甲基丁香酚含量，以期建立誘導(dǎo)率高、有效成分含量高的北細(xì)辛愈傷組織培養(yǎng)體系，為后續(xù)懸浮培養(yǎng)體系建立提供高產(chǎn)細(xì)胞系，使高效生產(chǎn)藥用成分甲基丁香酚等次生代謝物成為可能，以減少對(duì)野生資源的消耗，保證其種質(zhì)資源的可持續(xù)開發(fā)與利用奠定基礎(chǔ)。本研究得到的主要結(jié)果如下。
　　1.以北細(xì)辛葉片、葉柄、根莖及根為外植體，通過暗

3、培養(yǎng)的方式均能誘導(dǎo)出愈傷組織，其中葉片和葉柄的誘導(dǎo)率高達(dá)100％和77％，適合進(jìn)一步擴(kuò)大培養(yǎng)。
　　2.葉片愈傷組織誘導(dǎo)的最適植物生長調(diào)節(jié)劑為NAA與6-BA組合，濃度分別為1.0 mg·L-1與0.5 mg·L-1;葉柄愈傷組織誘導(dǎo)的最適植物生長調(diào)節(jié)劑為IBA與6-BA組合，濃度分別為8.0mg·L-1與0.5 mg·L-1;適合根部和根狀莖愈傷組織誘導(dǎo)的植物生長調(diào)節(jié)劑也是IBA與6-BA組合，濃度分別為0.5 mg·L-1與0

4、.5 mg·L-1和2.0 mg·L-1與0.5 mg·L-1。
　　3.以微波萃取法提取葉片愈傷組織和葉柄愈傷組織揮發(fā)油，經(jīng)HPLC檢測其中甲基丁香酚含量分別為196ug·ml-1和907ug·ml-1，因此可通過愈傷組織的大量培養(yǎng)來增加北細(xì)辛地上部分的藥用價(jià)值。
　　4.葉柄愈傷組織和葉片愈傷組織在50天內(nèi)可分化成不定根，其最適植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)分別為NAA與6-BA組合（濃度分別為1.0 mg·L-1與0.5 mg·L-