乳腺癌危險(xiǎn)因素及其遺傳易感性的分子流行病學(xué)研究.pdf

1、我國(guó)女性乳腺癌的發(fā)病率雖然較低，但近二十余年乳腺癌的發(fā)病率呈明顯上升趨勢(shì)，目前已成為威脅我國(guó)女性健康的最重要的疾病之一。乳腺癌的發(fā)生是遺傳和環(huán)境因素交互作用的結(jié)果，其確切的發(fā)病原因尚不明確。流行病學(xué)、臨床和遺傳學(xué)研究確定了多個(gè)生物和社會(huì)因素可能導(dǎo)致乳腺癌發(fā)生的危險(xiǎn)性增加。目前確定的多個(gè)可能引起乳腺癌危險(xiǎn)性增加的因素大多與體內(nèi)雌激素水平或/和雌激素暴露時(shí)間有關(guān)。由于女性月經(jīng)、生殖因素與體內(nèi)性激素的暴露水平或/和暴露時(shí)間有密切的關(guān)系，因此目

2、前國(guó)內(nèi)外有關(guān)月經(jīng)、生殖因素與乳腺癌關(guān)系的研究進(jìn)行不少，但結(jié)論尚不一致，主要與研究的樣本量、不同人群的社會(huì)經(jīng)濟(jì)狀況等因素有關(guān)。也有研究認(rèn)為內(nèi)源性性激素的暴露聯(lián)合腫瘤的雌激素受體(ER)和孕激素受體(PR)狀態(tài)與乳腺癌的發(fā)病有關(guān)。但目前有關(guān)人體內(nèi)類固醇性激素水平與乳腺癌關(guān)系的研究多為高加索人群，而中國(guó)人群體內(nèi)類固醇性激素水平較西方人群低，因此有必要在中國(guó)人群中進(jìn)行體內(nèi)類固醇性激素水平及ER/PR狀態(tài)與乳腺癌關(guān)系的研究。在乳腺癌發(fā)病過(guò)程中，不

3、同個(gè)體對(duì)環(huán)境暴露的反應(yīng)存在易感性，目前認(rèn)為大部分乳腺癌的遺傳易感性與常見(jiàn)的低共顯性基因的變異有關(guān)。雌激素作為重要的致癌因子在乳腺癌的發(fā)生過(guò)程中起著重要的作用，雌激素致癌作用的一個(gè)重要機(jī)制是雌激素代謝產(chǎn)物能夠引起DNA的氧化損傷并導(dǎo)致DNA的單鏈斷裂。有研究表明乳腺癌患者及其一代直系親屬存在DNA修復(fù)能力缺陷，另外乳腺癌易感基因BRCA1、BRCA2在DNA修復(fù)過(guò)程中起重要作用。因此，由DNA修復(fù)基因單核苷酸多態(tài)性(SNPs)導(dǎo)致的人體D

4、NA修復(fù)能力改變可能與乳腺癌的遺傳易感性有關(guān)。在DNA修復(fù)通路中尋找與乳腺癌遺傳易感性相關(guān)的功能性多態(tài)性位點(diǎn)是目前的一個(gè)研究熱點(diǎn)。 本研究旨在通過(guò)宏觀流行病學(xué)、血清流行病學(xué)和分子流行病學(xué)相結(jié)合的研究手段，采用病例對(duì)照研究方法，對(duì)月經(jīng)、生殖因素，體內(nèi)性激素暴露水平以及與人體DNA修復(fù)能力相關(guān)的重要基因功能性SNPs單獨(dú)或聯(lián)合與中國(guó)人群乳腺癌的關(guān)系進(jìn)行研究，研究結(jié)果在進(jìn)一步闡明乳腺癌的發(fā)病機(jī)制和發(fā)現(xiàn)與我國(guó)人群乳腺癌易感性相關(guān)的危險(xiǎn)基

5、因型，并將其作為分子標(biāo)志物用于篩選高危人群或易感個(gè)體從而實(shí)施目標(biāo)明確的個(gè)體預(yù)防等方面具有重要的理論和實(shí)踐意義。 第一部分月經(jīng)、生殖因素與乳腺癌關(guān)系的病例對(duì)照研究采用病例對(duì)照研究，對(duì)經(jīng)病理確診的488例乳腺癌病例和482例對(duì)照進(jìn)行月經(jīng)、生殖因素與乳腺癌關(guān)系的單因素和多因素的logistic回歸分析，評(píng)價(jià)江蘇地區(qū)女性月經(jīng)、生殖因素與乳腺癌發(fā)病危險(xiǎn)的關(guān)系。 單因素logistic回歸分析結(jié)果顯示，與初潮年齡≤15歲者相比，初潮

6、年齡為16、17及≥18歲者的OR值(95﹪CI)分別為0.50(0.35-0.71)、0.31(0.21-0.45)和0.28(0.19-0.41)；與活產(chǎn)數(shù)為1者相比，活產(chǎn)數(shù)為2、3和≥4者的OR值(95﹪CI)分別為0.58(0.41-0.82)、0.51(0.31-0.83)和0.29(0.16-0.49)，說(shuō)明初潮年齡大、活產(chǎn)數(shù)多能降低乳腺癌的發(fā)病危險(xiǎn)性；而首胎活產(chǎn)年齡≥27歲者患乳腺癌的危險(xiǎn)性是≤22歲的2.43倍(95﹪C

7、I=1.62-3.46)，說(shuō)明首胎活產(chǎn)年齡大患乳腺癌的危險(xiǎn)性增加；有流產(chǎn)史和無(wú)母乳喂養(yǎng)史者患乳腺癌的危險(xiǎn)性亦增加[OR值(95﹪CI)分別為1.65(1.26-2.16)、1.99(1.31-3.04)]。多因素logistic回歸分析結(jié)果與單因素分析結(jié)果較為一致。研究結(jié)果表明，月經(jīng)、生殖因素在江蘇地區(qū)女性乳腺癌的發(fā)病過(guò)程中起重要作用。 第二部分血漿性激素水平與雌(孕)激素受體在絕經(jīng)后女性乳腺癌發(fā)生中的交互作用研究采用病例對(duì)照研

8、究，使用放射免疫方法直接檢測(cè)199名絕經(jīng)后乳腺癌病例和214名絕經(jīng)后健康對(duì)照的血漿中雌二醇及睪酮的水平，運(yùn)用logistic回歸模型分析血漿性激素水平與乳腺癌的關(guān)系，同時(shí)分析雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)狀態(tài)與血漿雌二醇和睪酮水平在乳腺癌發(fā)生過(guò)程中的交互作用。研究結(jié)果顯示，與血漿中含低水平雌二醇或睪酮者相比，血漿中含高水平雌二醇者乳腺癌的危險(xiǎn)性顯著升高(OR=1.97，95﹪CI=1.18-3.29)；血漿中含高水平睪酮者乳腺癌

9、的發(fā)病危險(xiǎn)性升高，接近統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性水平(OR=1.62，95﹪CI=0.95-2.77)。按ER、PR狀態(tài)分層分析后顯示，體內(nèi)含高水平雌二醇或睪酮的絕經(jīng)后女性與低水平組比較患ER、PR均陽(yáng)性乳腺癌的危險(xiǎn)性分別升高3.93倍(OR=3.93，95﹪CI=1.48-10.46)或4.08倍(OR=4.08，95﹪CI=1.55-10.77)，但未發(fā)現(xiàn)血漿中雌二醇、睪酮水平與ER、PR均陰性的乳腺癌有關(guān)。同時(shí)，高水平雌二醇與ER/PR陽(yáng)性在乳

10、腺癌的發(fā)生中呈顯著的交互作用(OR交互=2.13，95﹪CI=1.10-4.13)。研究結(jié)果表明，體內(nèi)高水平的雌二醇、睪酮暴露能顯著增加絕經(jīng)后女性乳腺癌特別是ER、PR均陽(yáng)性乳腺癌的發(fā)病危險(xiǎn)性，且雌二醇和ER/PR間存在顯著的交互作用。 第三部分DNA修復(fù)基因XRCC1、ADPRT功能性單核苷酸多態(tài)性與乳腺癌遺傳易感性關(guān)系的病例對(duì)照研究XRCC1和ADPRT是機(jī)體修復(fù)DNA堿基損傷和單鏈斷裂損傷過(guò)程中的關(guān)鍵酶，XRCC1和ADP

11、RT基因中可能引起DNA堿基損傷修復(fù)功能降低的多態(tài)改變可能與腫瘤的易感性有關(guān)。本病例對(duì)照研究選擇456名乳腺癌病例和487名對(duì)照，對(duì)位于XRCC1基因啟動(dòng)子區(qū)的T-77C多態(tài)性以及引起氨基酸改變的多態(tài)性位點(diǎn)Arg194Trp(C/T)，Arg280His(G/A)和Arg399Gln(G/A)和ADPRTVal762Ala(T/C)的多態(tài)性改變與中國(guó)人群乳腺癌的遺傳易感性進(jìn)行研究。結(jié)果顯示，XRCC1-77T＞C、Arg194Trp、A

12、rg280His、Arg399Gln和ADPRTVal762Ala多態(tài)性位點(diǎn)的變異等位基因在對(duì)照中的頻率分別為0.116、0.290、0.119、0.270和0.444；在病例中的頻率則分別為0.102、0.300、0.121、0.257和0.417，各位點(diǎn)等位基因頻率在病例和對(duì)照間的分布均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。多元logistic回歸分析顯示，XRCC1-77變異型雜合子CT和變異型純合子CC均與乳腺癌的發(fā)病危險(xiǎn)性無(wú)關(guān)(CT基因型的調(diào)整

13、OR=0.90，95﹪CI=0.63-1.29，CC基因型的調(diào)整OR=0.95，95﹪CI=0.23-4.04)。同樣，多元logistic回歸分析也表明Arg194Trp、Arg280His和Arg399Gln多態(tài)性以及ADPRTVal762Ala多態(tài)性均與乳腺癌的發(fā)病危險(xiǎn)性無(wú)顯著關(guān)聯(lián)。分層分析及多個(gè)位點(diǎn)的聯(lián)合分析也均未發(fā)現(xiàn)XRCC1、ADPRT的多態(tài)改變與乳腺癌的發(fā)病危險(xiǎn)性有關(guān)。研究結(jié)果表明，XRCC1-77T＞C、Arg194Tr

14、p、Arg280His、Arg399Gln和ADPRTVal762Ala多態(tài)改變可能與中國(guó)人群的乳腺癌發(fā)病危險(xiǎn)性無(wú)關(guān)。 第四部分胸苷酸合酶基因功能性多態(tài)性與乳腺癌遺傳易感性關(guān)系的病例對(duì)照研究流行病學(xué)研究資料顯示，飲食中葉酸供應(yīng)不足可導(dǎo)致乳腺癌發(fā)病危險(xiǎn)性升高。參與葉酸代謝的關(guān)鍵酶的多態(tài)改變可能通過(guò)影響DNA甲基化以及DNA的合成而與腫瘤易感性有關(guān)。 胸苷酸合酶(TYMS)通過(guò)將dUMP轉(zhuǎn)化為dTMP提供DNA合成和修復(fù)過(guò)程

15、所必須的胸腺嘧啶脫氧核苷。在TYMS基因5，端啟動(dòng)子的增強(qiáng)子區(qū)有一含3個(gè)(TSER3R)或2個(gè)(TSER2R)28bp的重復(fù)序列多態(tài)性，在TYMS基因3’端非翻譯區(qū)(TS3，-UTR)1494bp有一個(gè)6bp核苷酸片段的缺失(TS3'-UTRdel6)或插入(TS3'-UTRins6)多態(tài)性。這兩個(gè)TYMS基因變異可能具有功能性的改變，因而可能與乳腺癌的遺傳易感性有關(guān)。為驗(yàn)證這一假設(shè)，我們通過(guò)較大樣本的乳腺癌病例對(duì)照研究(444例病例和

16、473例對(duì)照)，對(duì)TYMS基因TSER2R/3R和TS3’-UTRdel6/ins6多態(tài)性與中國(guó)人群乳腺癌遺傳易感性的關(guān)系進(jìn)行研究。 結(jié)果顯示，TS3'-UTRdel6/ins6多態(tài)性位點(diǎn)三種基因型的頻率分布在病例和對(duì)照間有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(P=0.035)。多元logistic回歸分析顯示，與攜帶野生型純合子TS3'-UTRdel6/del6者相比，攜帶ins6/ins6突變型純合子的個(gè)體患乳腺癌的危險(xiǎn)性降低41﹪(調(diào)整OR=

17、0.59，95﹪CI=0.36-0.97)，但攜帶雜合子del6/ins6者乳腺癌的發(fā)病危險(xiǎn)性沒(méi)有明顯改變(調(diào)整OR=1.09，95﹪CI=0.81-1.45)。分層分析結(jié)果顯示，攜帶TS3’UTRins6/ins6基因型的保護(hù)作用在大年齡(＞48歲)、絕經(jīng)后以及月經(jīng)初潮晚(≥16歲)的女性個(gè)體更為明顯。本次研究中我們未發(fā)現(xiàn)TSER2R/3R多態(tài)性與中國(guó)人群的乳腺癌發(fā)病危險(xiǎn)性有關(guān)。研究結(jié)果表明，TS3’-UTRdel6多態(tài)改變可能與中國(guó)