江浙部分地區(qū)不同禽源新城疫病毒的分子流行病學(xué)及其生物學(xué)特性.pdf

1、新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一種禽類的急性、高度接觸性、毀滅性疾病，被列為A類動(dòng)物傳染病，給世界各地養(yǎng)禽業(yè)帶來巨大威脅。由于NDV是單股負(fù)鏈RNA病毒，有很高的變異能力，其基因型的變化非常迅速，因而近年來不同禽源NDV的致病力也明顯增強(qiáng)。 目前對(duì)病毒的分子流行病學(xué)研究主要有三種方法，利用單克隆抗體技術(shù)進(jìn)行的基因分型，限制性核酸內(nèi)切酶分析，特定基因片段的體外擴(kuò)增及序列測(cè)定和繪制系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹。如果加強(qiáng)ND流行毒株分

2、子流行病學(xué)研究，并篩選出不同禽源均適用的具有優(yōu)良免疫原性的毒株作為良好的疫苗株，則可以一定程度上防止該病的流行。本試驗(yàn)從江蘇及其周圍地區(qū)分離到源于三黃雞、烏骨雞、鴨、鵝、孔雀等禽類的12株NDV，取其具有代表性的7株進(jìn)行了基因分型、生物學(xué)特性研究和免疫原性比較。 選擇F基因起始密碼子開始的1-385bp核苷酸序列，對(duì)其進(jìn)行克隆及核苷酸序列分析。測(cè)定結(jié)果表明，其中6個(gè)毒株F蛋白的裂解位點(diǎn)氨基酸組成為<'112>R／K-R-Q-K／

3、R-R<'117>，具有強(qiáng)毒株裂解位點(diǎn)氨基酸組成特點(diǎn)，與ICPI和IVPI測(cè)定結(jié)果相吻合；核苷酸序列同源性分析顯示，6株分離毒株核苷酸序列具有95.9％-100％的同源性，與F<,48>E<,9>的核苷酸序列同源性達(dá)85.8％-89.3％。對(duì)本試驗(yàn)的6個(gè)毒株和國(guó)內(nèi)現(xiàn)已克隆測(cè)序的NDV毒株以及國(guó)外部分毒株其23株繪制基因系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹，結(jié)果表明6株歸屬于基因Ⅶ型。 本試驗(yàn)測(cè)定了分離于三黃雞、烏骨雞、孔雀、鵝、鴨等不同禽源的7株ND

4、V的血凝特性、血凝解脫時(shí)間、雞胚半數(shù)死亡量、腦內(nèi)致病指數(shù)、靜脈致病指數(shù)，并與NDV強(qiáng)毒株F<,48>E<,8>進(jìn)行了比較，試驗(yàn)結(jié)果顯示，7株NDV的毒力除分離自鴨的一株Y01屬于弱毒株外，其余6株的毒力與F<,48>E<,8>相當(dāng)。采用分離的基因Ⅶ型的NDV毒株和F<,48>E<,8>制成滅活疫苗，免疫試驗(yàn)雞，進(jìn)行免疫保護(hù)力比較試驗(yàn)。結(jié)果表明8株NDV的免疫原性有很大差異，SHJ00對(duì)8株NDV的D值均大于等于1，具有較高的攻毒保護(hù)率，