柔嫩艾美爾球蟲莫能菌素抗藥株的誘導(dǎo)及子孢子膜生理生化指標(biāo)的檢測(cè).pdf

1、目前防治雞球蟲病的主要手段仍然是藥物防治。然而，大量抗球蟲藥物的使用不可避免地使球蟲對(duì)各種藥物產(chǎn)生了抗藥性。因此，對(duì)球蟲抗藥性的研究是當(dāng)前的一個(gè)重要課題。 本試驗(yàn)選擇柔嫩艾美爾球蟲豪頓株(Eimeriatenella，Houghtonstrain)作為母源株(即敏感蟲株，記做MON-S(o))，分別以100mg/kg與125mg/kg莫能菌素作為初始誘導(dǎo)濃度，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)經(jīng)過(guò)35次傳代后，分別以雛雞盲腸病變記分(LS)、卵囊產(chǎn)量(

2、OP)、最適抗球蟲活性百分率(POAA)、病變記分減少率(RLS)、相對(duì)卵囊產(chǎn)量(ROP)和抗球蟲指數(shù)(ACI)四項(xiàng)參數(shù)以及綜合抗藥性指數(shù)(GI)作為抗藥性判定指標(biāo)，對(duì)兩個(gè)誘導(dǎo)株進(jìn)行了抗藥性評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，本試驗(yàn)成功地誘導(dǎo)出了對(duì)不同濃度的莫能菌素(125mg/kg和200mg/kg)分別具有不同程度抗藥性的兩個(gè)抗藥蟲株(分別記作MON-R(o)-1和MON-R(o)-2)。再對(duì)各誘導(dǎo)蟲株進(jìn)行單卵囊傳代和單孢子囊傳代，分別得到一個(gè)抗藥性更

3、強(qiáng)的子株，為后期進(jìn)一步探討球蟲抗藥性機(jī)制提供了很好的模型。 對(duì)球蟲進(jìn)行子孢子的提取和純化(敏感蟲株與兩個(gè)抗藥蟲株的子孢子分別記做(MON-S(s)、MON-R(s)-1和MON-R(s)-2)。分別對(duì)各蟲株子孢子膜的流動(dòng)性(測(cè)量DPH在膜內(nèi)的熒光偏振值)、子孢子內(nèi)Na+/K+濃度(原子吸收法)以及膜上Na+-K+-ATP酶(比色法，通過(guò)ATP試劑盒檢測(cè))的活性進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明，敏感蟲株子孢子膜的流動(dòng)性、子孢子內(nèi)Na+/K+濃度

4、以及膜上Na+-K+-ATP酶活性均高于抗藥蟲株子孢子膜的各相應(yīng)指標(biāo)，即MON-S(s)的膜內(nèi)DPH熒光偏振值、Na+/K+濃度以及Na+-K+-ATP酶活性的測(cè)量值分別為：0.267、9.9/7.5、5.05；MON-R(s)-1分別為：0.284、7.9/6.3、4.37;MON-R(s)-2分別為：0.195、7.7/6.3、4.52(其中DPH偏振值越高，膜流動(dòng)性越低)。同時(shí)又發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)1.0μg/ml莫能菌素作用1小時(shí)后，MO

5、N-S(s)的三個(gè)指標(biāo)分別升高48.6％、81.3％/61.82％、62.7％；MON-R(s)-1分別升高27.0％、69.93％/63.30％、52.1％；MON-R(s)-2分別升高19.7％、38.31％/32.14％、41.3％。 通過(guò)給雛雞接種柔嫩艾美爾球蟲敏感蟲株和莫能菌素抗藥蟲株，對(duì)莫能菌素與馬杜霉素的交叉抗藥性進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)馬杜霉素仍然能夠很好地控制住莫能菌素抗藥蟲株所引起的雞球蟲病。同時(shí)又研究了馬杜霉素