香椿葉黃酮類化合物酶法轉(zhuǎn)化條件的研究.pdf

1、香椿Toona sinensis(A.Juss.)Roem為楝科香椿屆多年生落葉喬木，是一種藥食兼用的植物資源，其葉含有豐富的黃酮類化合物。研究表明，香椿黃酮具有明顯的抗氧化、抗菌、抗病毒及抗炎等藥理功效。為進一步提高該類化合物的抗氧化能力，本文對香椿黃酮的提取工藝，酶法轉(zhuǎn)化條件、酸法水解、酶法轉(zhuǎn)化前后和酸法水解前后的物質(zhì)組成成分含量的變化及其抗氧化能力進行了初步研究，主要結(jié)果如下。
　　 建立了水提、醇沉和有機溶劑萃取法分離提

2、取香椿黃酮的新工藝：通過單因素和正交試驗，確定水法提取的最佳工藝條件為：料液比1:25，提取兩次，微沸保持2 h，水提物中香椿黃酮的純度為14.89％。乙醇濃度調(diào)至80％，沉淀12 h，純度提高到23.19％。選用水飽和正丁醇作為萃取劑，萃取兩次，萃取率達(dá)到93.61％。
　　 采用響應(yīng)面法對香椿黃酮酶法轉(zhuǎn)化條件進行了優(yōu)化，得到最佳轉(zhuǎn)化條件為：加酶量：0.4838g/g底物，底物濃度：8.77 mg/mL，轉(zhuǎn)化時間：7.08 h

3、，轉(zhuǎn)化率達(dá)到93.23％。
　　 TLC及HPLC分析結(jié)果表明，香椿黃酮經(jīng)過β-葡萄糖苷酶轉(zhuǎn)化后，表現(xiàn)出明顯的苷元特征，水溶性相應(yīng)減少，在有機溶劑中的溶解度相應(yīng)加大。與標(biāo)準(zhǔn)品進行對照，轉(zhuǎn)化前香椿黃酮中不含山奈酚，含有少量的槲皮素苷元；轉(zhuǎn)化后槲皮素和山奈酚的含量分別增加了1.228％及1.334％，蘆丁含量減少了0.905％。酸處理后，蘆丁完全水解，槲皮素含量增加了2.115％，山奈酚含量增加了5.424％，與該方法相比，酶法轉(zhuǎn)化

4、后槲皮素的提高量為酸處理后的58.06％，而山奈酚的提高量為酸處理后的24.59％。
　　 總還原力、FRAP法測定的抗氧化能力及DPPH自由基清除能力的測定結(jié)果表明，酶轉(zhuǎn)化后香椿黃酮的抗氧化能力介于Vc和BHT之間，略高于轉(zhuǎn)化前的香椿黃酮和酸處理后的香椿黃酮，高于蘆丁。槲皮素的抗氧化能力高于蘆丁。β-胡蘿卜素褪色法抗氧化能力測定結(jié)果表明，與對照相比，酶法轉(zhuǎn)化后香椿黃酮的抗氧化能力略高于轉(zhuǎn)化前的香椿黃酮，低于酸處理后的香椿黃酮。