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文檔簡介
1、高危型人乳頭狀瘤病毒(High risk human papilomavirus,HR-HPV)的感染是導致宮頸浸潤癌(invasive cervical cancer,ICC)和子宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervicalintraepithelial neoplasia,CIN)發(fā)生的主要致病因素。文獻報道在CIN和ICC中p16INK4a蛋白表達與病變程度密切相關,主要在進展期表達。作為HPV病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白,HPVL1殼蛋白是人體對HP
2、V免疫的主要攻擊位點,主要表達于病毒的早期復制期,在進展期表達消失。p16INK4a蛋白與高危型HPV或高危型HPV的不同亞型的關系及p161NK4a蛋白與L1殼蛋白聯(lián)合表達在預測CIN轉(zhuǎn)歸中的意義,需要深入探討。
目的:
探討宮頸病變中p16INK4a蛋白與HPV病毒的關系及其與L1殼蛋白的聯(lián)合表達意義
方法:
為確定宮頸病變中p16INK4a蛋白與HR—HPV的關系,對97例C
3、IN1、32例CIN2、30例CIN3、4例ICC及隨機選取的161例正常組織,共324例進行p16INK4a蛋白免疫組織化學染色,并采集研究對象的陰道分泌物、宮頸細胞學樣本進行第二代雜交捕獲實驗(hvbrid capture2,HC2)。
為探討宮頸病變中p16INK4a蛋白與HPV各亞型的關系及其與L1殼蛋白聯(lián)合表達方式,共分析188份病理標本:45例CIN1,31例CIN2,64例CIN3,48例ICC。用三明治切片
4、法,第一張和最后一張蠟卷用于HE染色,中間蠟卷用于DNA提取和p16INK4a蛋白及L1殼蛋白免疫組化標記。HE切片由病理專家組完成診斷。將經(jīng)過病理確認合格的蠟卷提取DNA,以SPF10為引物擴增,以DNA酶免疫分析(DEIA)確定有無HPVDNA陽性,然后LiPA法對擴增產(chǎn)物進行型別判斷。同時進行p16INK4a蛋白和L1殼蛋白免疫組織化學染色。
為探討p16INK4a蛋白與L1殼蛋白的聯(lián)合表達方式對于預測CIN1進展的
5、意義,隨訪CIN1病例6年,45例CIN1均來自第二部分病例。
結(jié)果:
HR—HPV陽性組和陰性組的p16INK4a蛋白的表達率分別為69.5%和10.5%,兩組的p16INK4a蛋白的表達率差異有統(tǒng)計學意義(x2=40.40,P=0.000)。瘤變組織中HR—HPV DNA陽性與p16INK4a蛋白陽性的總的關聯(lián)強度OR值為19.36(6.39.58.61)。在本組CIN2、CIN3、ICC中,共可以檢測到
6、15種不同的HPV亞型,其中包括高危型16、18、31、33、39、51、52、53、56、58和66,低危型6、11、68、74。CIN2中DNA陽性率最多的HPV亞型依次是HPV16、HPV33和HPV58,CIN3中HPV亞型依次是HPV16、HPV58和HPV33,ICC中的HPV亞型依次是HPV16、HPV18和HPV31。HPV16DNA陽性組p16INK4a蛋白的表達率為93.8%,DNA陰性組的表達率為41.8%,HPV
7、16的DNA陽性與p16INK4a蛋白的表達正相關(P<0.001)。HPV16DNA陽性組L1殼蛋白的表達率為12.4%,HPV16 DNA陰性組的表達率為34.2%,HPV16的DNA陽性與L1殼蛋白的表達負相關(P<0.001)。HPV33、HPV18、HPV31、HPV58等各亞型的DNA陽性與L1及p16INK4a蛋白的表達無明確相關性(P>0.05)。根據(jù)L1及p16INK4a蛋白表達情況,將研究對象分為四組,即1)L1(+
8、)/p16INK4a(-)組24例,主要為CIN1,沒有CIN3或ICC。2)L1(+)/p16INK4a(+)組19例,在CIN1、CIN2、CIN3和ICC中分別為31.6%、26.3%、31.6%、10.5%。3)L1(-)/p16INK4a(-)組31例,其中CIN1為48.4%,CIN2為25.8%、CIN3和ICC分別為16.1%、9.7%.4)E1(-)/p16INK4a(+)組114例,主要為CIN3和ICC(83.2%
9、)。隨診顯示,L1(-)/p16INK4a(-)表達方式的患者,無一例進展,L1(-)/p16INK4a(+)表達方式的患者,進展率為66.7%(2/3),L1(+)/p16INK4a(-)表達方式的患者,病變進展率為9.5%(2/21),L1(-)/p16INK4a(+)表達方式的患者,疾病進展率為33.3%(2/6)。
結(jié)論:
p16INK4a蛋白與HR-HPV特別是HPV16正相關,CIN1中L1殼蛋白
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