銀杏葉提取物對VD小鼠學習記憶的影響及其機理的研究.pdf

1、本文研究了銀杏葉提取物對血管性癡呆的治療作用，觀察大腦皮層內神經元形態(tài)、數量的變化情況，并通過對大腦皮層及海馬結構內NOS活性及nNOS、SS、CCK的蛋白表達水平的變化，探求血管性癡呆的發(fā)生發(fā)展的機制。 研究方法：選用健康雄性昆明小鼠50只，按體重隨機分為正常對照組、假手術組、血管性癡呆(VD)模型組、血管性癡呆+低劑量金納多(20mg/kg)治療組、血管性癡呆+高劑量金納多(40mg/kg)治療組，每組10只動物，治療組于動

2、物造模24小時后開始給藥，每天一次，共10天。最后一次給藥24小時后，采用Y-迷宮測試各組小鼠學習記憶行為，用Nissl染色觀察小鼠大腦皮層神經元形態(tài)及數量的變化，NADPH-d組織化學方法和ABC免疫組化方法測試小鼠大腦皮層及海馬結構內神經元NOS的活性和nNOS、SS、CCK的蛋白表達水平。 研究結果： 1.迷宮實驗結果：①學習記憶能力檢測結果：與正常對照組(43.25±13.52)及假手術組(46.78±10.13

3、)相比較，各實驗組的迷宮實驗學會次數明顯增多，分別為VD模型組(130.80±40.66)、低劑量金納多治療組(81.12±18.13)和高劑量金納多治療組(63.52±15.92)(p＜0.05)；與VD模型組比較，低劑量金納多治療組和高劑量金納多治療組迷宮學會次數明顯減少(p＜0.05)；與低劑量金納多治療組比較，高劑量金納多治療組迷宮學會次數明顯減少(p＜0.05)。②記憶保持力檢測結果：與正常對照組(87.32±14.17)及假

4、手術組(88.41±12.56)相比較，各實驗組的迷宮實驗記憶保持率明顯降低，分別為VD組(50.12±12.15)、低劑量金納多治療組(70.62±14.63)和高劑量金納多治療組(73.87±16.21)(p＜0.05)；與VD模型組比較，低劑量金納多治療組和高劑量金納多治療組迷宮實驗記憶保持率明顯升高(p＜0.05)。 2.Nissl染色結果：正常對照組和假手術組相應層面的大腦皮層神經元形態(tài)正常，胞體輪廓及尼氏體清晰可見；

5、高、低劑量金納多治療組神經元形態(tài)出現(xiàn)變化，胞體腫脹或皺縮；而VD模型組神經元形態(tài)進一步變化，神經元數量減少。 3.NADPH-d組化反應結果：①大腦皮層：與正常對照組(39.40±11.21)及假手術組(40.63±12.33)相比較，VD模型組(59.67±12.19)大腦皮層NOS陽性細胞數明顯增多(p＜0.05)；與VD模型組比較，低劑量金納多治療組(42.67±9.75)和高劑量金納多治療組(44.33±9.54)大腦皮

6、層NOS陽性細胞數明顯減少(p＜0.05)。②海馬結構：與正常對照組(18.73±5.64)及假手術組(19.95±5.37)相比較，VD模型組(25.56±4.53)海馬CA1區(qū)NOS陽性細胞數明顯增多(p＜0.05)；與VD模型組比較，低劑量金納多治療組(19.21±6.75)和高劑量金納多治療組(20.33±5.54)海馬CA1區(qū)NOS陽性細胞數明顯減少(p＜0.05)。各組之間CA3區(qū)及齒狀回NOS陽性細胞數無明顯差異。

7、 4.ABC免疫組化反應nNOS結果：①大腦皮層：與正常對照組(42.94±8.38)及假手術組(43.31±8.33)相比較，VD模型組(58.39±10.82)大腦皮層nNOS陽性細胞數明顯增多(p＜0.05)；與VD模型組比較，低劑量金納多治療組(44.91±9.62)和高劑量金納多治療組(43.57±9.85)大腦皮層nNOS陽性細胞數明顯減少(p＜0.05)。②海馬結構：與正常對照組(16.73±4.15)及假手術組(16.9

8、9±5.12)相比較，VD模型組(22.98±4.65)海馬CA1區(qū)nNOS陽性細胞數明顯增多(p＜0.05)；與VD模型組比較，低劑量金納多治療組(17.54±4.72)和高劑量金納多治療組916.83±5.47)海馬CA1區(qū)nNOS陽性細胞數明顯減少(p＜0.05)。各組之間CA3區(qū)及齒狀回nNOS陽性細胞數無明顯差異。 5.ABC免疫組化反應SS結果：①大腦皮層：與正常對照組(84.37±18.38)及假手術組(83.31

9、±18.33)相比較，VD模型組(58.31±12.82)與低劑量金納多治療組(72.91±16.62)的SS陽性神經元數量明顯減少(p＜0.05)；與VD模型組比較，低劑量金納多治療組和高劑量金納多治療組(84.57±19.85)SS陽性神經元數量明顯增多(p＜0.05)；與低劑量金納多治療組比較，高劑量金納多治療組SS陽性神經元數量明顯增多(p＜0.05)。②海馬結構：(1)CA1區(qū)：與正常對照組(41.37±9.15)及假手術組(

10、42.89±10.17)相比較，VD模型組(23.78±6.65)與低劑量金納多治療組(32.54±8.71)海馬CA1區(qū)SS陽性神經元數量明顯減少(p＜0.05)；高劑量金納多治療組(38.83±7.67)與正常對照組及假手術組相比，海馬CA1區(qū)SS陽性神經元數量無明顯差異；與VD模型組比較，低劑量金納多治療組和高劑量金納多治療組海馬CA1區(qū)SS陽性神經元數量明顯增多(p＜0.05)；與低劑量金納多治療組比較，高劑量金納多治療組海馬C

11、A1區(qū)SS陽性神經元數量明顯增多(p＜0.05)。(2)CA3區(qū)：與正常對照組(17.68±5.32)及假手術組(18.78±5.12)相比較，VD模型組(11.37±3.78)海馬CA3區(qū)SS陽性神經元數量明顯減少(p＜0.05)；低劑量金納多治療組(15.63±3.72)與高劑量金納多治療組(17.33±6.86)與正常對照組及假手術組相比，海馬CA3區(qū)SS陽性神經元數量無明顯差異；與VD模型組比較，低劑量金納多治療組和高劑量金納多

12、治療組海馬CA3區(qū)SS陽性神經元數量明顯增多(p＜0.05)。(3)DG區(qū)：與正常對照組(10.13±2.62)及假手術組(10.62±3.52)相比較，VD模型組(4.78±2.47)DG區(qū)SS陽性神經元數量明顯減少(p＜0.05)；低劑量金納多治療組(15.63±3.72)及高劑量金納多治療組(8.52±3.25)與正常對照組及假手術組相比，DG區(qū)SS陽性神經元數量無明顯差異；與VD模型組比較，低劑量金納多治療組和高劑量金納多治療組

13、DG區(qū)SS陽性神經元數量明顯增多(p＜0.05)；低劑量金納多治療組與高劑量金納多治療組比較，DG區(qū)SS陽性細胞數無明顯差異。 6.ABC免疫組化反應CCK結果：①大腦皮層：與正常對照組(76.12±11.38)及假手術組(78.16±12.85)相比較，其它實驗各組的CCK陽性神經元數量明顯減少，分別為VD模型組(54.54±10.52)、低劑量金納多治療組(63.97±10.56)、高劑量金納多治療組(67.72±11.95

14、)(p＜0.05)；與VD模型組比較，低劑量金納多治療組和高劑量金納多治療組CCK陽性神經元數量明顯增多(p＜0.05)。②海馬結構：與正常對照組(38.56±9.15、18.72±6.25、10.35±2.26)及假手術組(36.26±7.19、17.32±4.68、9.18±2.87)相比較，其它實驗各組海馬CA1、CA3及DG區(qū)的CCK陽性神經元數量明顯減少，分別為VD模型組(22.65±4.52、11.21±4.23、4.71±

15、2.32)、低劑量金納多治療組(32.25±8.12、17.36±5.68、8.06±2.61)、高劑量金納多治療組(33.63±8.16、16.98±4.32、9.75±2.99)(p＜0.05)；對照組與假手術組相比，海馬CA1、CA3及DG區(qū)的CCK陽性神經元數量無明顯差異；與VD模型組比較，低劑量金納多治療組和高劑量金納多治療組海馬CA1、CA3及DG區(qū)的CCK陽性神經元數量明顯增多(p＜0.05)。 研究結論：銀杏葉提