銀杏葉提取物改善發(fā)育期癲癇大鼠學習記憶功能及其機制的研究.pdf

1、目的：目前，學習記憶等認知功能障礙是癲癇兒童在臨床診斷和治療中的常見問題，并且不同程度地影響了患兒的學習和生活。如何降低或消除認知功能障礙對癲癇患兒學習生活質(zhì)量的影響已成為患兒、家長和兒科醫(yī)生非常關心的一個非常重要的社會問題。事實上，目前對癲癇兒童認知功能障礙的機制尚不完全清楚，臨床也缺乏較好的處理措施。近年來國內(nèi)外將銀杏葉提取物(EGb)作為一種中樞神經(jīng)賦活劑廣泛應用于治療腦動脈硬化、腦梗塞等疾病所致的后遺癥和老年神經(jīng)精神癥狀如注意力

2、不集中、記憶力減退、意識模糊等，臨床上明顯地改善了腦功能不全病人的學習記憶能力，因而被認為是一種“認知增強劑”。但是EGb對發(fā)育中癲癇兒童的學習記憶等認知功能障礙是否有作用，目前還未見報道。本實驗旨在探討EGb對癲癇點燃模型幼鼠學習記憶等認知功能的影響及可能機制，為臨床應用EGb治療癲癇兒童認知功能障礙提供實驗依據(jù)。 方法：21d、35d不同日齡SD幼年大鼠，首先經(jīng)Y型電迷宮初步篩選后給予腹腔注射(ip)戊四氮(PTZ)制作癲癇

3、點燃發(fā)作模型，再將各日齡組隨機分為生理鹽水對照組(NS)、點燃對照組(PTZ)、EGb大(PTZ+EGb1)、中(PTZ+EGb2)、小(PTZ+EGb3)劑量治療組。EGb灌胃給藥，以Y型電迷宮學習記憶行為訓練方法觀察大鼠學習記憶等認知功能，堿羥胺比色法、免疫組織化學染色方法分別檢測海馬乙酰膽堿酯酶(AChE)、膽堿乙酰轉移酶(CHAT)的活性及N-甲基-D-天冬氨酸受體1(NMDAR1)的表達，并觀察EGb治療后對這些結果的影響。

4、 結果： 1.治療前大鼠電迷宮試驗達標所需電擊次數(shù)：不同日齡的各個點燃組與各自NS組相比，達到學會標準所需的電擊次數(shù)明顯增多(P<0.01)；21d日齡段與35d日齡段的PTZ點燃組相互比較，前者達標次數(shù)亦明顯增多(P<0.05)。 2.EGb治療后大鼠電迷宮試驗達標所需電擊次數(shù)：不同EGb劑量的各治療組大鼠達到學會標準的次數(shù)均明顯少于同齡PTZ組(P<0.01)，而同齡EGb大、中、小劑量治療組相互比較，達到學會

5、標準所需的電擊次數(shù)隨治療劑量的減少呈劑量依賴性遞增(P<0.01)；EGb各劑量治療組與治療前比較，達標次數(shù)明顯減少(P<0.01或P<0.05)，而NS組、PTZ組較治療前沒有明顯差異(P>0.05)。 3.海馬AChE、ChAT的活性：兩個日齡幼鼠PTZ組海馬AChE活性及ChAT活性均明顯低于各自的NS組(P<0.01)；各EGb治療組與其同齡PTZ組相比，隨治療劑量的增加，AChE活性逐漸降低、ChAT活性則逐漸提高，呈

6、劑量依賴性(P<0.01)；各組的兩個年齡段之間AChE、ChAT的活性均未示明顯差異(P>0.05)。 4.NMDAR1免疫組織化學染色：NMDAR1陽性細胞在各組大腦皮質(zhì)各層內(nèi)彌散分布，在海馬主要分布于CA1、CA3區(qū)錐體細胞層及齒狀回顆粒細胞層。陽性細胞表現(xiàn)為圓或橢圓形，大小不一，胞膜及胞漿內(nèi)見棕黃色免疫反應產(chǎn)物，以胞膜著色為主。各日齡PTZ組NMDAR1免疫反應產(chǎn)物COD值較各自NS組明顯增強(P<0.01)；不同日齡各

7、治療組與各自PTZ組比較，隨治療劑量的增加，NMDAR1免疫反應產(chǎn)物COD值逐漸降低，差異均有顯著性(P<0.01)；對各組不同日齡段之間進行比較，除PTZ組(P<0.01)外，其余各組間均無明顯差異(P>0.05)。 結論： 1.點燃模型中的反復癇性發(fā)作可以導致幼鼠學習記憶功能明顯下降。 2.癲癇發(fā)病年齡越早，學習記憶功能受損越嚴重。 3.EGb可以明顯改善發(fā)育期不同日齡點燃模型大鼠的學習記憶功能，而且