銀杏葉提取物對(duì)大鼠腎小球細(xì)胞外基質(zhì)的影響.pdf

1、目的:研究銀杏葉提取物(GBE)對(duì)高糖培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞(MC)細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)代謝的影響，進(jìn)而明確GBE對(duì)糖尿病腎病(DN)的防治作用并探討其作用機(jī)制。 方法:本實(shí)驗(yàn)主要通過體外高糖培養(yǎng)的大鼠MC進(jìn)行研究。設(shè)立正常對(duì)照組、高糖組、GBE低濃度組、GBE中濃度組、GBE高濃度組和卡托普利對(duì)照組。放射免疫法測(cè)定細(xì)胞漿內(nèi)的IV型膠原和層粘蛋白含量；免疫細(xì)胞化學(xué)法測(cè)定細(xì)胞纖溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、胰島素樣生長(zhǎng)因

2、子-1(IGF-1)和細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(EMMPRIN)的表達(dá)水平；RT-PCR法測(cè)定細(xì)胞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)mRNA的相對(duì)含量；western blot 法測(cè)定細(xì)胞中基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)、金屬蛋白酶組織抑制物-2(TIMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、金屬蛋白酶組織抑制物-1(TIMP-1)和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)的蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果:與高糖組相比，GBE中高濃度組Ⅳ型

3、膠原和層粘蛋白的表達(dá)均有明顯降低；GBE中高濃度組細(xì)胞內(nèi)PAI-1和IGF-1的表達(dá)水平降低，與高糖組相比皆有顯著性差異；GBE中高濃度組細(xì)胞內(nèi)EMMPRIN的表達(dá)和高糖組相比明顯增高；GBE中高濃度組的TGF-β1 mRNA的表達(dá)較高糖組明顯降低；與高糖組相比，GBE中高濃度組細(xì)胞內(nèi)TIMP-2、TIMP-1和CTGF的表達(dá)水平均顯著降低，而GBE中高濃度組細(xì)胞內(nèi)MMP-2和MMP-9的表達(dá)水平則明顯增高。 結(jié)論：高糖刺激了促

4、進(jìn)ECM合成的TGF-β1、CTGF和IGF-1的過度表達(dá)，GBE能明顯抑制TGF-β1、CTGF和IGF-1的表達(dá)；在高糖環(huán)境下，促進(jìn)ECM降解的MMP-2、MMP-9和EMMPRIN的表達(dá)降低，GBE升高了MMP-2、MMP-9和EMMPRIN的表達(dá)水平；在高糖環(huán)境下，抑制ECM降解的TIMP-2、TIMP-1和PAI-1的表達(dá)升高，GBE降低了TIMP-2、TIMP-1和PAI-1的表達(dá)水平。另外，GBE也顯著降低了高糖誘導(dǎo)的IV