銀杏葉提取物對(duì)糖尿病大鼠巨噬細(xì)胞及腎臟的影響.pdf

1、目的：觀察銀杏葉提取物對(duì)2型糖尿病大鼠血糖、胰島素水平的影響，以及其對(duì)糖尿病大鼠巨噬細(xì)胞功能及腎臟的影響。探討CD36、PPARγ與2型糖尿病的關(guān)系及銀杏葉提取物對(duì)糖尿病腎臟的保護(hù)機(jī)制。　　方法：雄性SD大鼠39只分成四組：正常對(duì)照組10只、高脂組10只、2型糖尿病(DM)對(duì)照組9只、銀杏葉提取物(EGb)治療組10只。后三組喂以高糖高脂飼料(飼料組成：10.0％豬油，20.0％蔗糖，2.5％膽固醇，1.0％膽酸鹽，66.5％常規(guī)飼料

2、)一個(gè)月，誘發(fā)胰島素抵抗，糖尿病組和治療組繼以低劑量鏈菌素(STZ，25mg/kg,)腹腔注射，誘發(fā)胰島素代償性分泌障礙，使之產(chǎn)生高血糖癥，復(fù)制2型糖尿病大鼠模型。EGb治療組按8mg.kg-1.d-1劑量腹腔注射銀杏葉提取物。對(duì)照組及糖尿病組腹腔注射等容積生理鹽水，每天一次，連續(xù)8周。治療結(jié)束后禁食12小時(shí)，并記錄24小時(shí)尿量后處死大鼠，觀測(cè)下列指標(biāo)：體重、腎重、血糖、尿糖、TC、TG、LDL、HDL、血胰島素；腎功能性指標(biāo)：尿量、2

3、4小時(shí)尿微量蛋白和N一乙酞R，D氨基葡萄糖昔酶(NAG)水平等腎功能性指標(biāo)；腎臟形態(tài)學(xué)觀察：取腎臟用10％福爾馬林固定，常規(guī)石蠟切面，HE染色，光鏡觀察腎臟顯微結(jié)構(gòu)。2.5％戊二醛固定，常規(guī)脫水、包埋，超薄切片，電鏡觀察腎臟超微結(jié)構(gòu)；巨噬細(xì)胞內(nèi)CD36、PPARγ基因表達(dá)水平的檢測(cè)：原位灌洗、培養(yǎng)、破碎腹腔和肺泡巨噬細(xì)胞，制成巨噬細(xì)胞懸液，RT-PCR法測(cè)定肺泡巨噬細(xì)胞CD36、PPARγ基因表達(dá)水平。以黃嘌呤氧化酶法測(cè)定巨噬細(xì)胞超氧化

4、物歧化酶活性、硫代巴比妥酸法測(cè)定丙二醛含量，硝酸還原酶法測(cè)定一氧化氮含量。腎臟組織MMP-9、TIMP-1、Ⅳ型膠原的表達(dá)水平的檢測(cè)：制造腎臟組織勻漿，RT-PCR法測(cè)定MMP-9、TIMP-1、Ⅳ型膠原的基因表達(dá)水平。用免疫組化方法測(cè)定MMP-9、TIMP-1、Ⅳ型膠原的蛋白表達(dá)水平?！?結(jié)論：1、EGb可降低2型糖尿病大鼠的高血糖和胰島素水平，增加胰島素敏感性，并能改善2型糖尿病大鼠的脂代謝異常。2、EGb可提高2型糖尿病大鼠肺