銀杏葉提取物對(duì)2型糖尿病大鼠睪丸萊迪希細(xì)胞的影響及作用機(jī)制.pdf

1、目的：觀察銀杏葉提取物(EGB)對(duì)2型糖尿病(DM)大鼠睪丸萊迪希細(xì)胞的影響.探討糖尿病造成睪丸萊迪希細(xì)胞損害的發(fā)病機(jī)理及銀杏葉提取物對(duì)糖尿病睪丸萊迪希細(xì)胞影響的作用機(jī)制. 方法：雄性SD大鼠30只,均分成三組:正常對(duì)照組、2型糖尿病對(duì)照組、EGB治療組.后兩組喂以高糖高脂飼料(飼料組成:10.0﹪豬油,20.0﹪蔗糖,2.5﹪膽固醇,1.0﹪膽酸鹽,66.5﹪常規(guī)飼料)一個(gè)月,誘發(fā)胰島素抵抗,DM組和EGB治療組繼以低劑量鏈脲

2、佐菌素(STZ,30mg/kg)腹腔注射,誘發(fā)胰島素代償性分泌障礙,使之產(chǎn)生高血糖癥,復(fù)制2型糖尿病大鼠模型.成模后EGB治療組按50rng.kg-1.d-1劑量灌胃EGB.正常對(duì)照組及DM對(duì)照組灌服等容積生理鹽水,每天一次,連續(xù)12周.治療結(jié)束后禁食12小時(shí)處死大鼠,觀測(cè)各組大鼠體重、腹圍、睪丸重量、檢測(cè)血糖、血胰島素、TC、TG、LDL-c、HDL-c水平;光鏡、電鏡下觀察睪丸形態(tài)學(xué)變化.酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(ELISA)法檢測(cè)血清黃

3、體酮(LH)、睪酮(T)水平;RT-PCR檢測(cè)睪丸萊迪希細(xì)胞LHR、StAR、P450scc、P450c17、17β-HSD3、3β-HSDl的基因表達(dá)水平. 結(jié)果：1、大鼠一般情況的觀測(cè):與正常組相比,糖尿病組大鼠體重明顯減輕(P<0.01),腹圍明顯縮小(P<0.01);經(jīng)EGB治療后,糖尿病大鼠體重增加,腹圍明顯增大,與糖尿病對(duì)照組相比有顯著差異fP<0.05). 2、血糖、血胰島素、TC、TG、LDL-C、HDL

4、-C檢測(cè)結(jié)果:與正常組相比,糖尿病組大鼠血糖、血胰島素、血TG、LDL-C明顯升高(P<0.01),血TC升高(P<0.05),HDL下降(P<0.05).經(jīng)EGB治療后,糖尿病大鼠血糖、血胰島素、TG明顯降低(P<0.01),血TC、LDL-c降低(P<0.05),HDL-c呈升高趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05). 3、血清LH和T水平檢測(cè)結(jié)果:與正常組相比,糖尿病組大鼠血清LH明顯降低(P<0.01),血清T亦降低(P<

5、0.05);經(jīng)EGB治療后,糖尿病大鼠血清LH、T明顯升高(P<0.05). 4、睪丸形態(tài)學(xué)檢測(cè)結(jié)果:大體觀:與正常組相比,糖尿病大鼠睪丸重量減輕(P<0.05);經(jīng):EGB治療后,糖尿病大鼠睪丸重量增加,與糖尿病對(duì)照組相比有明顯差異(P<0.05).鏡下觀:與正常組相比,光鏡下見(jiàn)糖尿病大鼠萊迪希細(xì)胞數(shù)目明顯減少,細(xì)胞多呈圓形或卵圓形且較正常組縮小,染色質(zhì)濃集, 深染;電鏡下表現(xiàn)為萊迪希細(xì)胞體積縮小,核固縮,胞質(zhì)內(nèi)線粒體擴(kuò)張,線

6、粒體嵴模糊不清,胞漿內(nèi)脂滴增多.EGB治療后光鏡下見(jiàn)大鼠萊迪希細(xì)胞在曲細(xì)精管間和血管周圍間分布數(shù)量明顯增加,大小、形態(tài)接近正常;電鏡下表現(xiàn)為L(zhǎng)eydig細(xì)胞線粒體較豐富,胞漿內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度增生擴(kuò)張,脂滴相對(duì)減少. 5、L,eydig細(xì)胞LHR、StAR、P450scc、P450c17、17β-HSD3、3β-HSD1的基因表達(dá)水平檢測(cè)結(jié)果:與正常組相比,糖尿病組大鼠Leydig細(xì)胞LHR基因表達(dá)增高(P<0.05),P450scc

7、基因表達(dá)明顯降低(P<0.01),StAR、17β-HSD3及3β-HSD1基因表達(dá)降低(P<0.05),P450c17基因表達(dá)改變無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);經(jīng)EGB治療后,糖尿病大鼠LHR基因表達(dá)明顯降低(P<0.01),StAR、P450scc基因表達(dá)明顯升高(P<0.05),P450c17、17β-HiSD3及3 β-HSD1較糖尿病組大鼠基因表達(dá)呈現(xiàn)升高趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05). 結(jié)論： 1、2型

8、糖尿病造成大鼠嚴(yán)重的糖、脂代謝紊亂,EGB可調(diào)節(jié)2型糖尿病大鼠的血糖和血脂水平,明顯改善2型糖尿病大鼠的糖脂代謝紊亂. 2、2型糖尿病可影響萊迪希細(xì)胞LHR、StAR、P450scc、17β-HSD3及3β-HSD1的基因表達(dá)水平,代償性的引起LHR基因表達(dá)水平增高,同時(shí)使StAR、P450scc17β-HSD3及3β-HSD1基因表達(dá)水平明顯降低,嚴(yán)重的降低了萊迪希細(xì)胞合成和分泌睪酮的能力.而EGB可以明顯上調(diào)StAR、P45