甲硝唑羧甲基殼聚糖緩釋微球的研究.pdf

1、背景:結(jié)腸腸道內(nèi)含有大量的G-需氧菌和厭氧菌,是造成結(jié)腸直腸術后傷口感染的重要因素。在結(jié)腸直腸術前的腸道準備中,通過口服抗生素,減少結(jié)腸內(nèi)的細菌數(shù)量,可有效降低局部和全身感染的發(fā)生率。目前常用的抗生素,多為殺滅G-需氧菌的氨基糖甙類抗生素慶大霉素,和殺滅厭氧菌的硝基咪唑類抗生素甲硝唑(MZ)。前者在消化道很少吸收,到達結(jié)腸后直接發(fā)揮局部殺菌作用；后者口服后在胃和小腸很快吸收,通過血液循環(huán)到達結(jié)腸部位,發(fā)揮藥效,因而存在局部藥物濃度較低的

2、不足,需要多次多日用藥。甲硝唑亦是內(nèi)科潰瘍性結(jié)腸炎、Crohn病和腸阿米巴的常用藥物,長期服用,副作用明顯。將甲硝唑制成結(jié)腸靶向緩釋制劑,可增加局部的藥物濃度,可減少藥物的吸收,降低血藥濃度,減輕全身副作用,減少用藥次數(shù),縮短手術準備時間,增加患者的耐受性。殼聚糖及其衍生物羧甲基殼聚糖(CMC)兼有pH依賴性、結(jié)腸菌群觸發(fā)性及結(jié)腸粘附性等結(jié)腸靶向釋放特性,且無毒、來源豐富、價格低廉,具有良好的生物相容性和可降解性等優(yōu)點,是眾多的結(jié)腸靶向

3、釋藥系統(tǒng)中較安全、效果可靠的輔料之一。 目的: 1.探討乳化交聯(lián)法制備甲硝唑羧甲基殼聚糖(MZ-CMC)微球,正交設計優(yōu)化制備工藝。 2.將MZ-CMC微球裝于結(jié)腸溶腸溶空心膠囊,探討體外釋放特性。 3.研究MZ-CMC微球結(jié)腸溶膠囊在家兔體內(nèi)結(jié)腸釋放藥代動力學特性。 方法: 1.以CMC作為基質(zhì),將MZ均勻分散在CMC生理鹽水溶液中,加入含1％司盤-80的液體石蠟中,以一定的速度和溫度下

4、攪拌,降溫后加入戊二醛交聯(lián)固化,反應3h后砂芯漏斗真空抽濾,石油醚、丙酮洗滌,即得微球。 2.選定CMC濃度、投藥比、交聯(lián)度、乳化轉(zhuǎn)速等4個因素,各分3個水平,以微球的50～200μm粒徑分布百分數(shù)(％)、載藥量(％)、包封率(％)為評價指標,按L9(34)正交設計,優(yōu)選最佳工藝條件。 3.按最佳工藝條件制備微球,用光學顯微鏡及掃描電子顯微鏡(SEM)觀察,并測定粒徑分布百分數(shù)(％)、載藥量(％)、包封率(％),計算綜合

5、評分。 4.以pH1.2的鹽酸溶液作為人工胃液,pH6.8的磷酸緩沖液作為人工小腸液,pH7.6的磷酸緩沖液作為人工結(jié)腸液,觀察MZ-CMC微球在三種溶液中的釋放情況。 5.將MZ-CMC微球裝于結(jié)腸溶腸溶空心膠囊,先放入人工胃液中2h,然后人工小腸液中3h,最后人工結(jié)腸液中12h,觀察結(jié)腸靶向性及緩釋情況。 6.家兔口飼MZ-CMC微球結(jié)腸溶膠囊,高效液相法測定家兔血液中的甲硝唑濃度,建立甲硝唑藥時曲線,計算藥

6、代動力學參數(shù)。 結(jié)果: 1.乳化交聯(lián)法制備MZ-CMC微球,正交實驗優(yōu)化工藝,Z-分綜合評價法將多指標歸一化處理,得到各指標對綜合指標的影響大小依次為：乳化轉(zhuǎn)速>投藥比>交聯(lián)度>CMC濃度；通過直觀分析,最佳工藝組合為:CMC濃度：2.5％,投藥比(MZ/CMC)：4,交聯(lián)度(GD/CMC)：2,乳化轉(zhuǎn)速：400r.p.m。 2.用最佳工藝制備6批微球,肉眼觀微球呈小顆粒狀,顏色微黃；光學顯微鏡下,見微球粘連少,

7、外觀較圓整。SEM下見微球表面較多褶皺,有少量MZ晶體附在微球表面。微球50～200gm粒徑分布百分數(shù)為(48.86±2.07)％,載藥量為(48.19±1.48)％,包封率為(37.46±1.93)％,綜合評分為1.61,為正交實驗的最優(yōu)結(jié)果。 3.MZ-CMC微球分別在人工胃液、人工小腸液、人工結(jié)腸液中6～8h釋放完畢；微球前2h釋放較快,符合零級方程釋藥；就整條曲線而言,微球釋藥Weibull分布的擬合效果最佳。

8、4.MZ-CMC微球結(jié)腸溶膠囊依次在人工胃液、人工小腸液、人工結(jié)腸液中進行體外釋藥,在人工胃液和人工小腸液無藥物釋放,在人工結(jié)腸液中0.5h內(nèi)膠囊崩解,在8h累積釋放度100％。 5.MZ原料藥在家兔體內(nèi)的藥代動力學參數(shù)為:Tmax1h、Cmax13.499μg/ml、AUC49.889μg·h/ml;MZ-CMC微球結(jié)腸溶膠囊在家兔體內(nèi)的藥代動力學參數(shù)為：Tmax8.5h、Cmax14.617μg/ml、AUC25.279μg

9、·h/ml;MZ-CMC微球結(jié)腸溶膠囊的相對生物利用度為50.7％。 結(jié)論: 1.乳化交聯(lián)法制備MZ-CMC微球,正交實驗所得最佳工藝比較穩(wěn)定。 2.MZ-CMC微球在人工胃液、人工小腸液、人工結(jié)腸液均有緩釋作用,MZ-CMC微球結(jié)腸溶膠囊具有結(jié)腸靶向性和緩釋效果。 3.MZ原料藥的Tmax明顯小于MZ-CMC微球結(jié)腸溶膠囊的Tmax,間接驗證了MZ-CMC微球結(jié)腸溶膠囊的結(jié)腸靶向性；而Cmax又明顯大于