華南地區(qū)豬場流感病毒血清學調查及重組H3N2亞型SIV候選疫苗株的初步研究.pdf

1、豬是流感病毒重要的宿主之一，不僅能感染人流感病毒，而且能感染禽流感病毒，對當前的流感生態(tài)環(huán)境的形成起到重要的作用。甲型H1N1/2009流感病毒的爆發(fā)，說明豬能夠獨立地促進流感毒株的產生。豬流感（Swine Influenza，SI）由豬流感病毒（Swine Influenza Virus，SIV）引起，是一種急性和高度感染性呼吸系統(tǒng)性疾病，一般呈現(xiàn)地方流行性。典型的臨床癥狀表現(xiàn)為突發(fā)性咳嗽、高熱、嗜睡、厭食、鼻涕、呼吸困難和體重下降等

2、，具有高發(fā)病率但低死亡率的特征。SI極易導致繼發(fā)感染或混合感染，以致進一步發(fā)展成豬呼吸道疾病綜合癥，造成一定的經濟損失。H1N1、H1N2和H3N2亞型豬流感病毒是目前主要的流行毒株。
　　為了調查中國華南地區(qū)豬群豬流感病毒和甲型 H1N1/2009流感病毒（H1N1pdm09）的流行情況，本研究于2013年10月至2014年9月期間，在中國華南地區(qū)的廣東省、江西省、湖南省、福建省和廣西壯族自治區(qū)共73個豬場，采集未進行流感疫苗免

3、疫的臨床健康豬的血清樣品2,208份。采用歐亞類禽豬流感 H1N1、類人豬流感H3N2和甲型H1N1pdm09流感病毒，通過血凝抑制試驗（HI），對這2,208份血清進行SIV和H1N1pdm09流感病毒血清學檢測。結果顯示流感病毒抗體為陽性的血清共1,269份（57.42％）。SIV和H1N1pdm09流感病毒的流行存在明顯的區(qū)域性差異，其中廣東省和廣西壯族自治區(qū)的感染率最高（p<0.01），分別為64.48%和75.00%。EA H

4、1N1、H3N2SIV和H1N1pdm09流感病毒抗體陽性率分別是22.51%、32.97%和26.49%。H1N1pdm09流感病毒的抗體幾何平均滴度（Geometric Mean Antibody Titers，GMT）最高（91.93±1.04，p<0.05）。EA H1N1和H3N2SIV在冬季血清陽性率最高，然而在冬末（2月）陽性率卻最低（p<0.01）。H1N1pdm09流感病毒抗體陽性率在5月和9月出現(xiàn)高峰（p<0.01）

5、。母豬體內的EA H1N1和H1N1pdm09流感病毒抗體陽性率分別為25.93%和28.04%，均比仔豬（19.63%和23.29%）和育肥豬（22.32%和27.16%）高，但仔豬的H3N2 SIV抗體陽性率卻比較高。本研究為華南地區(qū)豬場SIV和H1N1pdm09流感病毒的預防提供參考依據(jù)。
　　普遍認為，疫苗是抵抗流感病毒感染最有效的方法。至今，油佐劑的全病毒滅活疫苗是應用最廣泛且技術最成熟的豬流感病毒疫苗。本研究利用反向遺

6、傳技術，成功構建了 H3N2亞型豬流感病毒 L22的8質粒系統(tǒng)。將 A/swine/Guangdong/L22/2010（H3N2）豬流感病毒的HA、NA基因與A/Puerto Rico/8/1934的6個內部基因片段重組，拯救出rL22/PR8。經鑒定，rL22/PR8的基因序列與親本毒株和PR8的相應基因片段序列一致。將rL22/PR8接種至9日齡的SPF雞胚后，其HA血凝效價提高到210，EID50結果提高到1.78×109EID