SLC30A8(ZnT8)基因多態(tài)性及其他危險(xiǎn)因素與2型糖尿病的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、第一部分
　　 背景：在世界范圍內(nèi)，2型糖尿病已成為僅次于癌癥和心腦血管疾病的第三大疾病，嚴(yán)重危害人類(lèi)的身體健康。2型糖尿病是一種復(fù)雜的疾病，是由于多種危險(xiǎn)因素共同作用的結(jié)果，其中包括環(huán)境因素和遺傳因素。隨著人們生活水平的提高以及生活的多樣化，2型糖尿病的患病率正在逐年上升。參與2型糖尿病發(fā)病危險(xiǎn)的因素有很多種，如年齡，性別，種族，家族病史，肥胖，高血壓等等。這些危險(xiǎn)因素彼此之間相互作用，其機(jī)制很是復(fù)雜。2型糖尿病的危險(xiǎn)因素已經(jīng)

2、有大量的文獻(xiàn)報(bào)道，主要包括非變更性因素和可變更性因素兩類(lèi)。其中非變更性因素主要包括遺傳因素以及遺傳基因作用。眾所周知的是2型糖尿病具有明顯的遺傳傾向；遺傳因素主要包括如：家族史、遺傳基因及民族與地區(qū)差異三個(gè)方面。本部分將采用病例.對(duì)照研究去探索重慶地區(qū)影響2型糖尿病發(fā)生的環(huán)境危險(xiǎn)因素，期望為積極有效開(kāi)展糖尿病的防治工作提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，同時(shí)為進(jìn)一步探討環(huán)境-基因之間可能存在的交互作用做些基礎(chǔ)工作。
　　 目的：通過(guò)病例對(duì)照研究，采用

3、流行病學(xué)調(diào)查的方法調(diào)查2型糖尿病的環(huán)境危險(xiǎn)因素。
　　 方法：2型糖尿病組(T2DM組)共入選.500例，平均年齡(55.4±12.2)歲。其中男349例，女151例。對(duì)照組共入選500例，平均年齡(55.6±11.7)歲；其中男332例，女168例。采用多因素非條件Logistic回歸分析篩選出2型糖尿病的危險(xiǎn)因素。
　　 結(jié)果：?jiǎn)我蛩胤菞l件Logistic回歸分析顯示，在所選擇的變量中，與2型糖尿病發(fā)病呈顯著性正相關(guān)

4、的變量有：吸煙史、飲酒史、生活壓力、冠心病家族史、糖尿病家族史、肥胖等8個(gè)危險(xiǎn)因素；通過(guò)多因素Logistic回歸分析顯示，入選主效應(yīng)模型的獨(dú)立危險(xiǎn)因素為吸煙史、生活壓力、糖尿病家族史、及肥胖。
　　 結(jié)論：2型糖尿病與吸煙、肥胖、生活壓力、糖尿病家族史存在著密切聯(lián)系，而且各因素之間也相互關(guān)聯(lián)。因此，早期、及時(shí)對(duì)上述可變更性危險(xiǎn)因素進(jìn)行全面干預(yù)，如控制血壓、血脂、體重，培養(yǎng)健康的生活方式，不吸煙、不飲酒，適當(dāng)參加體育運(yùn)動(dòng)，對(duì)控制

5、2型糖尿病的發(fā)生和發(fā)展有重要意義及影響。
　　 第二部分
　　 背景：2型糖尿病患者是一種復(fù)雜的多因素疾病，除了環(huán)境因素，包括飲食習(xí)慣和生活方式的變化的因素外，遺傳基因的變異也是2型糖尿病患者的重要危險(xiǎn)因素。在過(guò)去的十年中，已經(jīng)通過(guò)大量的努力來(lái)尋找2型糖尿病的易感基因，但進(jìn)展一直比預(yù)期的要慢的多。既往研究表明，有兩個(gè)家族參與細(xì)胞內(nèi)鋅水平的調(diào)節(jié)。一個(gè)是ZnT(鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體)家族，由基因SLC30A編碼，它通過(guò)使胞漿內(nèi)的鋅出胞或

6、進(jìn)入細(xì)胞器而降低胞漿內(nèi)鋅的濃度。另一個(gè)是ZIP(鋅結(jié)合蛋白)家族，由基因SLC39A編碼，它的作用是使細(xì)胞外的鋅進(jìn)入胞內(nèi)或者使細(xì)胞器中的鋅轉(zhuǎn)移到胞漿而提高胞漿中鋅濃度。鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8(zinc transporter8，ZnT8)是ZnT家族成員新近發(fā)現(xiàn)的重要成員之一，定位于胰島β細(xì)胞和少量α細(xì)胞中，為胰島特異性的鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，它被認(rèn)為是胰島β細(xì)胞特異的鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體，在胰島素的分泌、合成及儲(chǔ)存過(guò)程中發(fā)揮著不可或缺的作用。多個(gè)研究表明ZnT8的單核

7、苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)rs132266634與2型糖尿病(type2 diabetes，T2DM)關(guān)聯(lián)。此SNP rs132266634的危險(xiǎn)堿基與靜脈糖耐量試驗(yàn)中胰島素分泌減少關(guān)聯(lián)；與胰島素原向胰島素的轉(zhuǎn)化過(guò)程障礙關(guān)聯(lián)；與空腹血糖的升高關(guān)聯(lián)。因此，ZnT8可作為T(mén)2DM的基因標(biāo)志。
　　 雖然已經(jīng)有少數(shù)幾個(gè)基因的多態(tài)性比如PPARG、KCNJ11、及TCF7L2基因被

8、發(fā)現(xiàn)和2型糖尿病的發(fā)病有關(guān)，并已經(jīng)在歐洲人群中進(jìn)行了成功復(fù)制，但在中國(guó)人群中進(jìn)行的研究相對(duì)較少。最近新出現(xiàn)的全基因組關(guān)聯(lián)研究(GWASs)方法使人們尋找2型糖尿病易感基因的興趣大大增加，事實(shí)證明也加速了2型糖尿病易感基因的發(fā)現(xiàn)。近年來(lái)，陸續(xù)報(bào)道了6個(gè)高密度(>300 K)GWA研究，以確定2型糖尿病的易感基因，其主要的研究均在高加索人種中進(jìn)行，并已經(jīng)進(jìn)行了成功的復(fù)制和驗(yàn)證，其中位于鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體附近的單核苷酸多態(tài)性(SNP)，如SLC30A8

9、基因多態(tài)性被證實(shí)和2型糖尿病存在關(guān)聯(lián)。另外在其它的研究中也表明，SLC30A8基因與多種人群的2型糖尿病患者存在關(guān)聯(lián)。SLC30A8基因全長(zhǎng)41.62kb，位于8q24.11，是鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白8(ZnT-8)的編碼基因，SLC30A8基因特異性地在胰島B細(xì)胞中表達(dá)。由于上述研究對(duì)象存在著明顯的種族差異，并且同樣也存在著明顯的居住環(huán)境、生活方式等等的不同，因此在2型糖尿病遺傳機(jī)制中可能存在不同的模式，因此，在不同種族中重復(fù)驗(yàn)證已報(bào)道過(guò)的疾病

10、易感基因是在復(fù)雜性疾病病理機(jī)制的研究中必不可少的環(huán)節(jié)。盡管這些研究所發(fā)現(xiàn)的SLC30A8基因多態(tài)性與2型糖尿病之間的關(guān)聯(lián)，但大部分的研究都集中在SNP單個(gè)位點(diǎn)，而很少構(gòu)建單體型。
　　 在本研究中，我們建立了SLC30A8基因的3個(gè)SNPs(rs2466295，rs4876703，rs11558471)的單倍型，并評(píng)估這些單倍型和重慶漢族人群2型糖尿病的發(fā)病存在關(guān)聯(lián)。
　　 目的：在最近的全基因組關(guān)聯(lián)研究中篩選出SLC3

11、0A8基因變異與2型糖尿病存在關(guān)聯(lián)。但在中國(guó)漢族人群中的研究目前還較少見(jiàn)。本研究的目的是探討SLC30A8基因的標(biāo)簽SNPs及其單倍型與中國(guó)重慶地區(qū)漢族人群2型糖尿病的關(guān)系。
　　 方法：1.1508中國(guó)重慶地區(qū)漢族2型糖尿病患者和1500年齡和性別匹配的對(duì)照者參加本項(xiàng)研究。調(diào)查內(nèi)容如下：
　　 基本信息：包括姓名、性別、年齡、出生地、受教育程度、職業(yè)及婚姻狀況等；
　　 生活方式信息：包括吸煙史、飲酒史、體力勞

12、動(dòng)強(qiáng)度、腦力勞動(dòng)強(qiáng)度、體育鍛煉程度、生活壓力、飲食習(xí)慣等因素；
　　 既往病史：研究對(duì)象既往患糖尿病、高血壓、高血脂及其他心腦血管疾病的情況；
　　 家族史：調(diào)查對(duì)象親屬中糖尿病、高血壓、高血脂及其他心腦血管疾病的患病情況；
　　 檢測(cè)指標(biāo)：人體測(cè)量和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)：體重、身高、體質(zhì)指數(shù)、收縮壓和舒張壓、空腹及餐后2h血糖(FPG，2hPBG)、糖化血紅蛋白(HBA1C)、空腹及餐后2hC肽(CP，2hCP)、空腹及

13、餐后2h胰島素(INS，2hINS)及血脂等。
　　 2.選擇人的SLC30A8基因3個(gè)標(biāo)簽SNPs(rs2466295，rs4876703和rs11558471)，采用實(shí)時(shí)熒光TaqMan基因分型技術(shù)進(jìn)行基因分型。
　　 3.比較病例對(duì)照組之間基因型的分布情況，并構(gòu)建單倍型，比較其分布情況。
　　 結(jié)果：rs11558471 AA基因型在2型糖尿病患者中明顯高于比對(duì)照組(46％比24％，P<0.001)。A-C