脂微球載體前列腺素E1對(duì)應(yīng)激性胃潰瘍大鼠Th17-Treg細(xì)胞平衡的影響.pdf

1、研究目的：
　　1、觀察大鼠在不同時(shí)長(zhǎng)束縛浸水應(yīng)激過(guò)程中,Th17/Treg細(xì)胞平衡的變化。
　　2、探討脂微球載體前列腺素E1對(duì)應(yīng)激性胃潰瘍大鼠Th17/Treg細(xì)胞平衡的影響。
　　研究方法：
　　1、20只雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組:正常對(duì)照組(N組)、3.5小時(shí)應(yīng)激組(S1組)、5小時(shí)應(yīng)激組(S2組)及8小時(shí)應(yīng)激組(S3組)。按不同時(shí)長(zhǎng)制作應(yīng)激性胃潰瘍模型。造模完成后收集大鼠外周血分離淋巴細(xì)胞及血漿,采用熒

2、光定量PCR方法分析Th17/Treg細(xì)胞相對(duì)應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子RORγt/Foxp3mRNA的表達(dá)量,并計(jì)算比值。采用ELISA檢測(cè)血漿IL-17A及TGF-β1水平,并評(píng)價(jià)胃潰瘍指數(shù)。
　　2、40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為5組:正常對(duì)照組(N組)、應(yīng)激組(S組)、脂微球空載體10μg/kg組(L組)、凱時(shí)低劑量1μg/kg組(P1組)和凱時(shí)高劑量10μg/kg組(P2組)。后面四組經(jīng)預(yù)處理后,制作3.5小時(shí)應(yīng)激性胃潰瘍模型。造模完成后

3、采集外周血分離淋巴細(xì)胞及血漿,采用熒光定量PCR方法分析Th17/Treg細(xì)胞相對(duì)應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子RORγt/Foxp3及分泌因子IL-17A/TGF-βmRNA的表達(dá)量,采用ELISA檢測(cè)血漿IL-17A及TGF-β1水平,采用試劑盒檢測(cè)血漿中的SOD活性及MDA濃度,并評(píng)價(jià)胃潰瘍指數(shù)(UlcerIndex,UI)及制作病理切片。
　　研究結(jié)果：
　　1、通過(guò)大鼠胃黏膜觀察,證明大鼠束縛浸水應(yīng)激模型制備成功,且隨著應(yīng)激時(shí)間的延

4、長(zhǎng),胃潰瘍指數(shù)進(jìn)行性升高(F=105.6,P=0.000)。各組大鼠外周血淋巴細(xì)胞Th17/Treg細(xì)胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子RORγt、Foxp3mRNA表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=4.434,P=0.019及F=7.385,P=0.003),但這兩者的比值差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2.511,P=0.096)。其中與N組比,S2和S3組大鼠外周血淋巴細(xì)胞RORγt和Foxp3mRNA表達(dá)量均升高,其中以S2組大鼠兩種因子mRNA及S3組的Fox

5、p3mRNA表達(dá)量升高明顯(p<0.05)。與N組比較,其余各組RORγt/Foxp3比值均是降低的,尤其在S1組和S3組降低明顯(p<0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。應(yīng)激組(S1、S2和S3組)IL-17A均升高,其中S2組與S3組顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=7.671,P=0.002),大鼠血漿TGF-β1水平隨著應(yīng)激時(shí)間的延長(zhǎng)而呈升高趨勢(shì),但差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.596,P=0.627)。
　　2、與應(yīng)激組(S組)比較

6、,脂微球空載體組(L組)各指標(biāo)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,剔除了脂微球載體對(duì)脂微球前列腺素E1治療應(yīng)激性胃潰瘍作用的影響。各組大鼠潰瘍指數(shù)、血漿丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=46.75,P<0.0001;F=5.961,P<0.05及F=13.39,P<0.01)。其中,凱時(shí)藥物治療組(P1和P2)潰瘍指數(shù)減輕,血漿MDA含量減少,SOD活性升高(p<0.05)。各組大鼠外周血RORγt、Foxp3mRNA表達(dá)及兩者的比值差

7、異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=8.755,P<0.0001;F=2.736,P=0.0472及F=4.715,P=0.004)。而各組IL-17A及TGF-βmRNA差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,各組大鼠血漿IL-17A表達(dá)水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.798,P=0.0115)而TGF-β表達(dá)沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2.548,P=0.0565)。其中,與S組比,P2組大鼠外周血淋巴細(xì)胞Foxp3、TGF-βmRNA表達(dá)上調(diào),血漿TGF-β1水平升高,

8、RORγt/Foxp3比值降低具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),而RORγt、IL-17AmRNA表達(dá)水平下降,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。
　　研究結(jié)論：
　　1、應(yīng)激性潰瘍大鼠Th17/Treg細(xì)胞相關(guān)因子表達(dá)有變化,推測(cè)Th17/Treg細(xì)胞功能失衡參與了應(yīng)激性胃潰瘍的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。
　　2、預(yù)先給予脂微球載體前列腺素E1治療可以減輕大鼠應(yīng)激性胃黏膜損傷,且前列腺素E1可能通過(guò)上調(diào)Treg細(xì)胞的表達(dá),逆轉(zhuǎn)應(yīng)激引