前列腺素E1對急性馬兜鈴酸腎病大鼠微血管損傷的干預研究.pdf

1、目的:通過關木通水煎劑灌胃制備急性馬兜鈴酸腎病(AAAN)大鼠模型，觀察其微血管損傷情況，應用前列腺素E1(PGE1)干預觀察其對腎臟微血管內(nèi)皮細胞特異抗原氨基肽酶P(APP)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和缺氧誘導因子(HIF-1α)的表達及大鼠24小時尿蛋白、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平的影響，探討前列腺素E1改善AAAN大鼠模型腎臟微循環(huán)障礙的作用和機理。 方法:將72只SD大鼠隨機分為3大組，每大組再按宰殺的

2、不同時間分為3組： (1) 干預組：24只，予關木通水煎劑灌胃60g/kg/d，相當于30ml/kg/d，分兩次給予，連用5天，同時每日第一次灌藥前尾靜脈注射前列腺素El(4μg/kg/d)，連用7天； (2) 模型組：24只，予關木通水煎劑灌胃劑量方法同干預組，尾靜脈只注射相同劑量生理鹽水； (3) 對照組：24只，灌相同體積自來水。實驗期間大鼠均自由飲食，飲水。灌藥后第3、5、7天分別處死干預組，模型組及對照

3、組大鼠各8只。留取血、尿、腎組織標本分別作生化、病理、免疫組織化學等檢查。采用過氧化物酶標記的鏈霉卵白素(SP)染色技術，對腎組織中氨基肽酶P(APP)、VEGF、HIF-1α進行染色，再對其進行測量，最后進行統(tǒng)計學分析。 結果: (1)體重：模型組與干預組大鼠體重隨著實驗天數(shù)的增加是降低的，但模型組降低的更加明顯，至第5、7天體重分別為190.00±8.14g、180.67±13.60g，與對照組有顯著性差異，干預組至

4、第7天體重為199.88±11.14g，與對照組無顯著性差異，而與模型組第7天相比有顯著性差異； (2)24小時尿蛋白定量：模型組第3、5、7天尿蛋白逐漸升高，與對照組相比均有顯著性差異；干預組亦升高，與對照組相比均有顯著性差異，但干預組與模型組相比尿蛋白明顯減少，兩者之間有顯著性差異； (3)腎功能：模型組與干預組在實驗第3天BUN和Scr已開始升高，但僅模型組的Scr與對照組相比有顯著性差異，至實驗第5、7天BUN和

5、Scr逐漸升高，與對照組相比有顯著性差異，但干預組升高較模型組慢，在第5、7天與模型組均有顯著性差異； (4)腎臟病理檢查：腎臟HE染色可見在實驗過程中模型組較干預組病變嚴重，電鏡超微結構觀察可見模型組出現(xiàn)基底膜斷裂，內(nèi)皮細胞破裂，而干預組僅出現(xiàn)內(nèi)皮細胞腫脹，明顯較模型組病變輕； (5)腎臟免疫組化觀察：模型組從第3天開始JG12陽性表達開始減少，其管周毛細血管(PTC)密度值為(18.57±1.13)/0.065mm2

6、，至第7天進一步減少，PTC密度值為(10.71±0.76)/0.065mm2，與對照組比有顯著性差異，而干預組較模型組陽性表達明顯要多，至第7天其值為(19.86±0.90)/0.065mm2，與模型組有顯著性差異；對照組腎小球微血管密度值分別為(39.45±4.32)/腎小球、(40.35±5.09)/腎小球、(40.01±6.92)/腎小球，隨著實驗進行密度值亦減少，至第7天為(27.51±5.11)/腎小球，與對照組比有顯著性差

7、異，而干預組至第7天僅減少為(35.91±4.05)/腎小球，與模型組有顯著性差異；HIF-1α在對照組幾乎沒有表達，模型組第3天僅微量表達，至第7天表達明顯增強，其IOD值為(5.78±0.91)×103，與對照組相比有顯著性差異，而干預組至第7天表達量要明顯較模型組弱，其IOD值為(3.02±0.37)×103，與模型組相比有顯著性差異；對照組VEGF大量表達，其IOD值分別為(38.47±6.19)×103、(35.96±3.25

8、)×103、(37.32±2.79)×103，模型組隨著實驗進行表達逐步減少，至第7天其IOD值為(4.65±0.97)×103，與對照組相比有顯著性差異，干預組表達較模型組為多，至第7天其IOD值為(18.27±4.01)×103，與模型組相比有顯著性差異。 結論: 1.急性馬兜鈴酸。腎病大鼠模型第3天開始腎臟微血管密度減少，繼而HIF-1α表達增加，VEGF表達下降可能是微血管損傷的原因。 2.PGE1可以提