前列腺素E1改善血管性癡呆大鼠認(rèn)知功能及相關(guān)血管新生機(jī)制研究.pdf

1、研究背景：血管性癡呆（Vascular Dementia，VD）是一種以認(rèn)知功能障礙為主要癥狀的臨床綜合征，發(fā)病率正在逐年提高，給社會(huì)及家庭造成了沉重的負(fù)擔(dān)。VD多繼發(fā)于腦血管疾病或伴有腦血管病高危因素，且近來(lái)研究認(rèn)為血管損傷和內(nèi)皮功能異常參與到VD的發(fā)生發(fā)展，尤其是丘腦、海馬及皮層缺血性改變，提示腦缺血與VD發(fā)生密切相關(guān)。海馬在學(xué)習(xí)功能中扮演著重要角色，對(duì)缺血缺氧性損傷較敏感，長(zhǎng)期慢性腦低灌注可繼發(fā)海馬缺血缺氧性損害，進(jìn)而影響其學(xué)習(xí)記

2、憶功能，與VD發(fā)生關(guān)系密切。而腦缺血后內(nèi)源性或外源性促血管生長(zhǎng)因子如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）的增加，可促進(jìn)缺血區(qū)及缺血周?chē)鷧^(qū)血管再生、改善側(cè)支循環(huán)、增加腦灌注，從而促進(jìn)腦功能恢復(fù)，且癡呆患者腦脊液中VEGF亦有升高。因此我們提出或許外源性促血管再生因子可通過(guò)促進(jìn)海馬組織血管再生而增加海馬組織灌注進(jìn)而改善認(rèn)知功能。研究認(rèn)為前列腺素E1（PGE1）可通過(guò)上調(diào)VEGF的

3、表達(dá)而促進(jìn)心臟血管再生，但PGE1對(duì)VD海馬組織的影響尚不清楚。
　　目的：探討PGE1對(duì)VD大鼠行為認(rèn)知功能的影響及相關(guān)血管再生機(jī)制。
　　方法：SD（Sprague Dawley，SD）大鼠隨機(jī)分到假手術(shù)組、PGE1組、溶劑對(duì)照組、PGE1+VEGFR拮抗劑組，每組12只，其中PGE1組、溶劑對(duì)照組、PGE1+VEGFR拮抗劑組采用雙側(cè)頸動(dòng)脈永久性結(jié)扎法（bilateral common carotid artery o

4、cclusion，BCCAO）制作VD模型，所有大鼠術(shù)后進(jìn)行5天的定位航行實(shí)驗(yàn)以篩選出造模成功大鼠，之后PGE1組予前列腺素E1注射液連續(xù)7天尾靜脈注射（10mg/kg/d），溶劑對(duì)照組給予等量的生理鹽水注射液注射，PGE1+VEGFR拮抗劑組在給予等劑量前列腺素 E1注射液治療的同時(shí)給予SU5416（VEGFR2特異性拮抗劑）腹腔注射（25mg/kg/d）。采用水迷宮實(shí)驗(yàn)對(duì)大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能進(jìn)行評(píng)價(jià)；免疫組化染色分別觀察海馬組織血管新

5、生情況；WB、RT-q PCR分別半定量測(cè)定海馬組織VEGF蛋白、VEGF mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
　　結(jié)果：定位航行實(shí)驗(yàn)結(jié)果各組平均潛伏期隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而呈遞減趨勢(shì)(P<0.01)，PGE1組逃避潛伏期小于溶劑對(duì)照組及PGE1+VEGFR拮抗劑組(P<0.05)，而溶劑對(duì)照組高于假手術(shù)組(P<0.05)；空間探索中，假手術(shù)組、PGE1組大鼠在原平臺(tái)位置附近來(lái)回穿梭游泳，軌跡呈“穿梭型”，而溶劑對(duì)照組及PGE1+VEGFR拮抗劑組

6、則沿著水池邊緣盲目隨機(jī)地游泳，軌跡呈“邊緣型”，各組跨越平臺(tái)次數(shù)如下：(假手術(shù)組：6.54±1.08，PGE1組：5.77±0.83，溶劑對(duì)照組：2.88±0.47，PGE1+VEGFR拮抗劑組：2.63±0.44)，其中溶劑對(duì)照組及VEGFR拮抗劑組跨越平臺(tái)次數(shù)明顯低于 PGE1組（P<0.01），而假手術(shù)組則高于溶劑對(duì)照組（P<0.01）；原平臺(tái)象限停留時(shí)間百分比如下：（假手術(shù)組：39.96％±4.43%，PGE1組：38.78%±

7、5.13%，溶劑對(duì)照組：20.42%±5.56%，PGE1+VEGFR拮抗劑組：21.08%±5.66%），其中PGE1組明顯大于溶劑對(duì)照組及PGE1+VEGFR拮抗劑組（P<0.05），而溶劑對(duì)照組小于假手術(shù)組（P<0.01）。海馬CA1區(qū)平均血管數(shù)目如下：（假手術(shù)組：8.83±0.85，PGE1組：17.24±1.65，溶劑對(duì)照組：14.54±1.02，PGE1+VEGFR拮抗劑組：13.33±1.10），其中PGE1組明顯高于溶劑

8、對(duì)照組及PGE1+VEGFR拮抗劑組（P<0.05），且溶劑對(duì)照組高于假手術(shù)組（P<0.01）。海馬組織 VEGF蛋白的相對(duì)表達(dá)量（假手術(shù)組：0.027±0.002，PGE1組：0.057±0.005，溶劑對(duì)照組：0.038±0.002，PGE1+VEGFR拮抗劑組：0.053±0.003），PGE1組及PGE1+VEGFR拮抗劑組明顯高于溶劑對(duì)照組（P<0.05），且溶劑對(duì)照組又高于假手術(shù)組（P<0.05），但PGE1組及VEGFR拮

9、抗劑組之間差別不明顯（P>0.05）。海馬組織VEGF mRNA的相對(duì)表達(dá)量如下：（假手術(shù)組：1.00±0.20，PGE1組，4.47±0.27，溶劑對(duì)照組：2.53±0.25，PGE1+VEGFR拮抗劑組：4.20±0.31），PGE1組及VEGFR拮抗劑組明顯高于溶劑對(duì)照組（P<0.05），而溶劑對(duì)照組較高于假手術(shù)組（P<0.05），但 PGE1組及 VEGFR拮抗劑組之間差別不明顯（P>0.05）。
　　結(jié)論：PGE1可通過(guò)