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文檔簡介
1、目的:血管性癡呆(vascular dementia, VD)是指由各種腦血管疾病(腦出血、腦梗死、皮層下白質(zhì)的可逆性病變)引起腦功能障礙導(dǎo)致的癡呆,是僅次于阿爾茲海默病的全球第二大癡呆疾病。血管性癡呆可分為多梗死性、關(guān)鍵部位梗死性、皮質(zhì)下性等多種類型,其中以多梗死性癡呆類型最多見,不僅表現(xiàn)為執(zhí)行能力及記憶力的損傷,還可出現(xiàn)精神障礙等癥狀。血管性癡呆的發(fā)病機(jī)制為細(xì)胞凋亡、氧化應(yīng)激、興奮性氨基酸毒性、炎癥等。近年來,氧化應(yīng)激自由基損傷機(jī)制
2、受到了廣泛關(guān)注。
血紅素氧化酶-1(HO-1)也稱熱休克蛋白,屬于微粒體酶,受Nrf2-ARE通路調(diào)節(jié)。HO-1與氧化應(yīng)激損傷密切相關(guān),多種應(yīng)激損傷(如缺血缺氧、炎癥、毒素等)都能誘導(dǎo)HO-1表達(dá)增加,使其產(chǎn)生細(xì)胞保護(hù)作用。HO-1的抗氧化應(yīng)激作用與其在體內(nèi)催化分解的代謝產(chǎn)物有密切關(guān)系, HO-1能夠降解血紅素產(chǎn)生膽綠素、CO、Fe2+等產(chǎn)物,而這些產(chǎn)物都具有抗氧化應(yīng)激作用。近年研究顯示,HO-1在抗氧化應(yīng)激過程中起到非常重要
3、的作用。
番茄紅素(Lycopene,LP)是一種類胡蘿卜素,廣泛存在于番茄、西瓜、胡蘿卜和葡萄柚等蔬菜水果中。番茄紅素具有很強(qiáng)的清除自由基和抗氧化作用。由于人體不能合成番茄紅素,因此必須從外界攝入加以補(bǔ)充。番茄紅素具有血管保護(hù)作用,能夠減緩動脈粥樣硬化,抗衰老。已證實番茄紅素對帕金森、癌癥、心臟病等多種疾病有作用,但是番茄紅素在血管性癡呆中的保護(hù)作用研究較少。本實驗通過觀察番茄紅素對血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及HO-1
4、在海馬神經(jīng)元組織的表達(dá)情況來探討番茄紅素對血管性癡呆的保護(hù)作用,為臨床治療血管性癡呆提供一個新的思路。
方法:選取健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,隨機(jī)分為模型組、假手術(shù)組、番茄紅素組,每組10只。應(yīng)用永久結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈的方法建立血管性癡呆模型。番茄紅素組灌胃給予番茄紅素10mg/kg/d,假手術(shù)組和模型組給予等量溶劑。給藥6周后,行Morris水迷宮實驗,測試各組大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力,行為學(xué)測試完畢后取材,用
5、免疫組織化學(xué)方法和免疫印跡法(western blot)測定海馬區(qū)HO-1的表達(dá)水平。
結(jié)果:
1.行為學(xué)測定
1.1.逃避潛伏期結(jié)果測定
水迷宮定位航行實驗顯示各組大鼠的逃避潛伏期從第2天開始均縮短,表明各組大鼠均有一定的學(xué)習(xí)記憶能力,但同時各組大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力又有差別。結(jié)果顯示各組之間大鼠的逃避潛伏期有差異(P<0.05),與假手術(shù)組相比,模型組1-4天的逃避潛伏期均明顯延長(P<0.05)
6、;與模型組相比,番茄紅素組的逃避潛伏期明顯縮短(P<0.05)。
1.2.穿越平臺次數(shù)
第5天進(jìn)行穿越平臺次數(shù)測定,穿越平臺次數(shù)與大鼠的記憶功能有關(guān),穿越平臺次數(shù)越多表明大鼠的記憶功能越強(qiáng)。與假手術(shù)組相比,模型組穿越平臺次數(shù)明顯減少(P<0.05);與模型組相比,番茄紅素組穿越平臺次數(shù)明顯增多(P<0.05),假手術(shù)組和番茄紅素組相比穿越平臺次數(shù)沒有顯著差異(P>0.05)。
2.番茄紅素對海馬CA1區(qū)HO
7、-1表達(dá)的影響2.1 western blot結(jié)果
大鼠海馬 CA1區(qū) HO-1表達(dá)情況:與假手術(shù)組相比,模型組 HO-1蛋白表達(dá)水平明顯增加(P<0.05)。與模型組相比,番茄紅素組HO-1蛋白表達(dá)水平明顯增高(P<0.05)。三組間比較HO-1蛋白表達(dá)水平有明顯差異(F=12.36, P<0.05)。
2.2.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
大鼠海馬CA1區(qū)HO-1蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù)結(jié)果:與假手術(shù)組相比,模型組海
8、馬神經(jīng)元萎縮,HO-1蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù)明顯增加(P<0.05);與模型組相比,番茄紅素組HO-1蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù)明顯增多(P<0.05)。三組間比較HO-1蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù)有明顯差異(F=19.78, P<0.05)。
結(jié)論:
1.番茄紅素可以使血管性癡呆大鼠的逃避潛伏期明顯縮短,穿越平臺次數(shù)明顯增加,表明番茄紅素可改善血管性癡呆大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。
2.番茄紅素可以上調(diào)血管性癡呆大鼠海馬組織CA1區(qū)
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