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文檔簡介
1、目的:本實驗通過觀察復(fù)腦靈口服液對血管性癡呆大鼠模型學(xué)習(xí)記憶功能及海馬細(xì)胞凋亡的研究,進(jìn)一步探討其對神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用及作用機制。
方法:采用無創(chuàng)動脈夾反復(fù)夾閉頸總動脈結(jié)合腹腔注射硝普鈉降壓的方法制作大鼠擬血管性癡呆動物模型。把50只健康的雌雄各半SD大鼠隨機分成5組,假手術(shù)組(A組)、模型組(B組)、復(fù)腦靈口服液低劑量組(C組)、中劑量組(D組)、高劑量組(E組),每組10只,各組大鼠于術(shù)后第3天開始給藥,每日灌胃給藥1次,
2、連續(xù)21日。各組于灌胃停止后第二天,采用MWM測試法進(jìn)行水迷宮實驗,及連續(xù)5天做定位航行實驗(place navigation),第6天開始做空間探索試驗(spacial probe test),實驗結(jié)束后斷頭取腦,應(yīng)用HE染色查看腦組織,TUNEL技術(shù)原位標(biāo)記凋亡細(xì)胞。
結(jié)果:水迷宮定位航行實驗顯示,模型組逃避潛伏期(escape laten)5天內(nèi)變化平緩,給藥治療的各組潛伏期隨著訓(xùn)練天數(shù)的增加而明顯縮短,模型組逃避潛伏期
3、與其他各組相比具有顯著性差異(P<0.01)。低劑量組、中劑量組、高劑量組逃避潛伏期均值從大到小依次排列,且各給藥組兩兩相鄰間比較無顯著性差異(P>0.05),不相鄰間兩組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。水迷宮空間探索試驗顯示,跨平臺次數(shù)中,各組與模型組比較均有顯著性差異(P<0.01)。給藥組相鄰兩組間兩兩比較,無顯著性差異(P>0.05),而不相鄰兩組比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
HE染色后,觀察顯示:除假手術(shù)組
4、和高劑量組外,各組均有不同程度的細(xì)胞損壞和萎縮。在大腦皮質(zhì)、海馬區(qū)出現(xiàn)了不等量的神經(jīng)元細(xì)胞變性,及細(xì)胞死亡。病變神經(jīng)元細(xì)胞體積縮小,核膜核仁模糊不清。
TUNEL技術(shù)原位標(biāo)記細(xì)胞凋亡示:①假手術(shù)組偶見TUNEL陽性反應(yīng)物;②模型組大鼠在海馬CA1區(qū)可見較多棕黃色TUNEL反應(yīng)陽性細(xì)胞;③復(fù)腦靈口服液各組大鼠海馬CA1區(qū)可見TUNEL反應(yīng)陽性細(xì)胞但較模型組明顯減少;④模型組凋亡指數(shù)顯著高于假手術(shù)組(P﹤0.01)。復(fù)腦靈口服液組
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